TLNO1-WT是野生型、2631-WT是突变体亲本、2631_L25是F2子代里面根长最长的25个混池、2631_S25是F2子代里面根长最短的25个混池,由上述双端测序的数据,怎么作BSA分析,写出shell脚本,SNP变异结果可视化用R中的QTLseqr进行
时间: 2024-11-15 07:27:30 浏览: 10
时间分辨室温磷光法研究奎宁和奎尼丁的分子表征 (2007年)
要在Shell脚本中进行基于单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism, SNP)的基因关联分析(Biological Sequence Analysis, BSA),并利用R包`QTLseqr`对SNP变异结果进行可视化,你需要遵循以下步骤:
1. **数据预处理**:
- 将双端测序数据(FASTQ文件)转换成BAM或BEDPE格式,可以使用samtools进行转换:
```
samtools view -bS <input.bam> > sorted_bam.bam
```
2. **提取SNPs**:
使用SNP caller工具如BCFTools或GATK HaplotypeCaller从BAM或BEDPE文件中识别SNPs:
```
bcftools mpileup -Ou -f reference.fasta sorted_bam.bam | bcftools call -mv > snps.vcf
```
3. **过滤SNPs**:
筛选高质量的SNPs,保留只有单一等位基因和高覆盖度的变异:
```
bcftools filter -i 'DP > 10 && MQ >= 40 && AB[1] > 0.9 && AB[2] > 0.9' snps.vcf > filtered_snps.vcf
```
4. **关联分析** (在R中):
- 安装`QTLseqr`包:`install.packages("QTLseqr")`
- 加载数据并进行遗传分析,假设你已经有了`filtered_snps.vcf`文件:
```R
library(QTLseqr)
snp_data <- read_vcf("filtered_snps.vcf")
bsa_results <- run_qtls(snps = snp_data, phenotypes = c("root_length_longest", "root_length_shortest"), genotypes = "geno_matrix", ...)
```
5. **可视化结果**:
- 使用`QTLseqr`提供的plot功能展示SNP关联的结果:
```R
plot(bsa_results, which_var="your_variable_of_interest", type="qq")
```
请注意,实际脚本可能需要根据你的数据集及实验特定的要求进行调整。同时,对于每个命令,确保你有正确的路径到参考基因组(reference.fasta)、已排序的BAM文件以及相应的参数。
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