以SRA数据库中DRP003950数据集为练习对象。该数据集使用Tamoxifen处理MCF-7细胞系,分别测定了1到12周处理组和对照组的表达谱。为简单起见,本实验仅要求比较处理一周后MCF-7表达谱的变化情况,使用Hisat2进行序列比对,使用subread包进行基因转录水平定量
时间: 2024-03-10 20:48:21 浏览: 117
好的,这是一个具体的数据分析任务。根据描述,以下是数据分析的步骤:
1. 下载并准备数据
首先,我们需要从SRA数据库下载DRP003950数据集中1周处理组的fastq文件。在本例中,下载的文件名为SRR1042867.fastq.gz。接着,我们需要下载并准备参考基因组文件,例如,使用Ensembl或NCBI等数据库下载人类基因组fasta文件和基因注释文件(gff3或gtf格式)。在本例中,我们使用GRCh38版本的人类基因组fasta和gff3文件(文件名分别为GRCh38.fasta和GRCh38.gff3)。
2. 序列比对
接下来,我们需要使用Hisat2进行序列比对。首先,我们需要构建索引文件,以便Hisat2在比对时可以快速查找参考基因组的信息。使用以下命令生成索引文件:
```
hisat2-build -p 4 GRCh38.fasta GRCh38_index
```
其中,-p参数指定使用的线程数,GRCh38.fasta为参考基因组文件,GRCh38_index为生成的索引文件名。
接着,我们可以使用以下命令进行序列比对:
```
hisat2 -p 4 -x GRCh38_index -U SRR1042867.fastq.gz -S SRR1042867.sam
```
其中,-p参数指定使用的线程数,-x参数指定使用的索引文件,-U参数指定输入的fastq文件,-S参数指定输出的sam文件。
3. 转录本定量
最后,我们需要使用subread包进行基因转录水平定量。我们可以使用以下命令进行转录本定量:
```
featureCounts -T 4 -a GRCh38.gff3 -o counts.txt SRR1042867.sam
```
其中,-T参数指定使用的线程数,-a参数指定基因注释文件,-o参数指定输出文件名,SRR1042867.sam为上一步Hisat2比对得到的sam文件。
这样,我们就完成了1周处理组MCF-7表达谱的变化情况分析。需要注意的是,这仅仅是一个简单的流程示例,具体的数据分析过程可能因实验设计、数据量、数据质量等因素而有所不同。
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