质粒转染细胞原理和流程是什么？

质粒转染细胞是将外源DNA质粒转移至细胞内，使其表达所需的蛋白质或RNA，从而实现基因编辑、基因治疗、蛋白质表达等应用。其原理是通过质粒载体中的启动子、转录终止子和选择性标记等元素将目的基因导入到细胞内，使其表达所需的蛋白质或RNA。具体流程如下：

1.将质粒载体与目的基因克隆至一起，形成重组质粒。

2.将重组质粒导入到目标细胞中，可采用化学转染、电转染、微粒子轰击等方法。

3.细胞内可通过启动子的作用将目的基因转录成mRNA，mRNA再转译成蛋白质。

4.选择性标记在细胞内标记质粒，可通过筛选或鉴定细胞内是否存在目的基因的表达来确定转染效果。

5.根据实验需要，可进行细胞的稳定转染或瞬时转染，以达到期望的表达水平和时间。