sanger试剂与氨基酸反应的原理
时间: 2023-06-20 07:05:04 浏览: 208
Sanger试剂是一种常用的蛋白质化学分析试剂,可以用于测定蛋白质的氨基酸组成和序列。Sanger试剂的主要成分是二氟二硫化叔丁醇(FDNB,又称二氟硫代苯甲酰叔丁醇),它可以与氨基酸中的氨基反应生成黄色的二氟苯甲酰氨基酸。
Sanger试剂与氨基酸反应的原理是:Sanger试剂中的二氟二硫化叔丁醇可以与氨基酸中的氨基反应,在氢氧化钠的作用下发生酰基转移反应,生成黄色的二氟苯甲酰氨基酸。这个反应是选择性的,只有氨基酸中的氨基可以反应,而其他官能团则不会发生反应。这样,就可以通过检测生成的二氟苯甲酰氨基酸的吸收光谱来确定样品中各个氨基酸的含量和序列。
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sanger试剂和Edman试剂与氨基酸反应的原理
Sanger试剂和Edman试剂都是用于氨基酸分析的试剂。
Sanger试剂是二氧化碳和2,4-二硝基氯苯反应生成的试剂,它可以与蛋白质中的游离氨基组成稳定的酰胺键,形成氨基酸-试剂缀合物。这种缀合物可以通过水解反应,将氨基酸从缀合物中释放出来,然后通过色谱等技术进行分离和检测。
Edman试剂是苯异氰酸反应生成的试剂,它可以与蛋白质中的N-末端氨基组成稳定的酰胺键,形成氨基酸-试剂缀合物。这种缀合物可以通过酸水解反应,将缀合物中的第一个氨基酸从缀合物中释放出来,然后通过色谱等技术进行分离和检测。
总的来说,这两种试剂都是利用化学反应将氨基酸与试剂缀合,然后通过水解或酸水解将氨基酸从缀合物中释放出来,用于氨基酸分析。
sanger试剂和Edman试剂与氨基酸反应的原理及反应举例
Sanger试剂和Edman试剂都是常用于氨基酸序列分析的试剂。它们的原理是通过与氨基酸的N末端发生特定的化学反应来标记和分离氨基酸。
Sanger试剂是二氧化碳二乙酯和二氟硝基苯的混合物,它能够与氨基酸的N末端的氨基发生酰胺化反应,形成稳定的巯基酰胺产物。这个产物可以通过色谱或电泳等技术进行分离和检测。例如,使用Sanger试剂对甘氨酸进行酰胺化反应,可以得到稳定的甘氨酸巯基酰胺产物。
Edman试剂是苯异氰酸酯衍生物,它可以与氨基酸的N末端的氨基发生互变异构反应,形成N-苄基氨基酸苯酰亚胺产物。这个产物可以通过酸性水解和色谱等技术进行分离和检测。例如,使用Edman试剂对丙氨酸进行反应,可以得到稳定的N-苄基丙氨酸苯酰亚胺产物。
总的来说,Sanger试剂和Edman试剂都是通过与氨基酸的N末端发生特定的化学反应来标记和分离氨基酸,从而实现氨基酸序列分析。
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