Robo1在糖尿病视网膜病变中RPE细胞的作用及小干扰RNA的影响

本研究论文标题为"Robo1在视网膜色素上皮细胞中的作用研究"，由黄旅珍、徐永胜和黎晓新三位作者合作完成，发表在中国科技论文在线。研究的目的是深入探讨神经导向因子Robo1在正常人眼视网膜及两种类型的严重眼病，即增生性糖尿病视网膜病变（PDR）和增生性玻璃体视网膜病变（PVR）中的表达及其在视网膜色素上皮细胞（RPE）中的功能。这项工作得到了高等学校博士学科点专项科研基金的支持。 研究方法涉及对正常成人眼球和PDR、PVR患者增殖膜的免疫组化分析，观察Robo1的表达位置，包括神经节细胞层、神经纤维层、内外丛状层和部分内核层细胞。同时，利用siRNA干扰技术来减少Robo1基因在RPE细胞中的表达，通过RT-PCR和Western Blot技术验证基因和蛋白质水平的变化。此外，通过MTT、Boyden小室、免疫荧光和流式细胞术对RPE细胞的增殖、迁移、伸展和细胞周期进行详细检测。 研究结果显示，Robo1在正常视网膜中有广泛表达，并且在PDR和PVR的增殖膜中也呈现阳性，显示出与血管内皮细胞、视网膜色素上皮细胞和胶质细胞的共表达。使用siRNA干扰技术成功地降低了Robo1基因的表达，随之而来的是RPE细胞的粘附、增殖、伸展和迁移能力显著下降。 论文的结论指出，Robo1不仅在正常眼睛中存在，而且其异常表达可能在PDR和PVR的发展过程中扮演一定角色。这表明，对Robo1在RPE细胞中的调控机制有深入理解，对于预防和治疗这两种眼病具有潜在的价值。研究使用的关键技术和方法包括小干扰RNA（siRNA）、视网膜色素上皮细胞、Robo1基因以及细胞生物学实验，这些都是现代眼科研究中探索分子机制和疾病干预的重要工具。