Ad5-hOPG-EGFP转染犬牙周韧带细胞的hOPG表达研究

本研究由唐焜琪和闫福华两位学者合作，针对的是"牙周韧带细胞(hOPG基因转染)"这一关键主题。他们的目标是通过体外技术，利用腺病毒载体Ad5-hOPG-EGFP来转染Beagle犬的牙周韧带细胞(PDLCs)，目的是观察和分析骨保护素(hOPG)在犬PDLCs中的表达行为。这项工作是在高等学校博士学科点专项科研基因资助项目和国家临床重点专科的支持下进行的，旨在为后续的牙周组织再生实验提供高表达hOPG基因的种子细胞。 首先，他们体外构建了携带hOPG基因的Ad5-hOPG-EGFP腺病毒载体，这种载体的特点在于它同时携带有绿色荧光蛋白(EGFP)，便于观察转染效果。转染过程中，研究人员采用高效的方法，如流式细胞术、实时定量PCR(RealTime PCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)以及Western Blot等，来精确检测hOPG基因的转录和翻译水平。 实验结果显示，Ad5-hOPG-EGFP成功实现了对Beagle犬PDLCs的有效转染，72小时后转染效率超过80%，并且被转染的细胞显示出明显的绿色荧光，这证明了hOPG基因在PDLCs中的确得到了表达。通过多种检测手段得出的结论一致，证实了hOPG基因在犬牙周韧带细胞内的表达能力。 该研究的关键词包括“牙周韧带细胞”、“骨保护素”以及“腺病毒载体”，反映出研究的焦点在于基因工程技术在牙周病治疗领域的应用，特别是通过基因转染来调控PDLCs的功能，以期改善牙周组织的再生能力。这篇首发论文对于理解hOPG在牙周组织再生过程中的作用具有重要的科学价值，为牙周疾病的治疗策略提供了新的思路和实验依据。