七鳃鳗CTSD成熟肽原核表达与水解活性研究

该研究论文聚焦于七鳃鳗（一种低等脊椎动物）组织蛋白酶D（cathepsin D，简称CTSD）的成熟肽结构域的原核表达及其功能探索。CTSD是一种溶酶体内的天冬氨酸蛋白酶，对于蛋白质的水解过程至关重要，在脊椎动物的免疫和消化系统中扮演着核心角色。七鳃鳗作为研究脊椎动物起源和进化的模型生物，其相关蛋白的研究有助于揭示这一类生物的演化历程。 研究者王红艳、段丹丹等人首先从七鳃鳗的基因组中成功克隆了CTSD成熟肽结构域，去除了信号肽和前体肽编码序列，将其插入到原核表达载体pColdⅠ中。通过在Rosetta表达系统中利用异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，他们实现了七鳃鳗CTSD成熟肽结构域蛋白的原核表达。实验过程中，研究人员处理了形成的包涵体，最终获得了可溶性的重组七鳃鳗CTSD成熟肽结构域蛋白。 功能性试验结果显示，这种成熟肽结构域蛋白显示出对牛血红蛋白的显著水解活性，这表明它具备相应的酶切能力。这一成果为深入理解七鳃鳗CTSD的生物学功能提供了重要的实验依据。此外，论文还强调了这项工作的研究背景，即借助国家自然科学青年基金、中国博士后科学基金、高等学校博士学科点专项科研基金等多个资助项目的支持，以及辽宁师范大学生命科学学院和七鳃鳗研究中心的合作。 论文的关键词包括“七鳃鳗”、“组织蛋白酶D”、“成熟肽结构域”、“基因克隆”和“原核表达”，反映出研究的核心内容和方法。该研究不仅提升了我们对七鳃鳗生物化学特性认识，也为其他科学家进一步探究这一领域的生物过程提供了新的研究工具和技术平台。这篇首发论文对于七鳃鳗生物学和进化生物学的研究领域具有重要意义。