人工microRNA驱动的番茄转抗黄瓜花叶病毒策略

人工microRNA抗黄瓜花叶病毒的番茄构建研究是由许鸥、张立红等人进行的一项创新性工作，发表在中国科技论文在线上。这项研究关注了植物RNA沉默作为一种有效的防御机制，用于抵御外来的遗传因子，如病毒。植物RNA沉默是指通过调控特定基因表达，使它们无法正常功能，从而达到抵抗病毒侵袭的目的。 研究的核心是利用人工合成的microRNA (miRNA)。miRNA是一类非编码RNA分子，能够在转录后水平上对基因表达进行精细调控。在本实验中，科研人员从黄瓜花叶病毒（CMV）复制酶基因中选择了一个21bp的保守序列，将其插入到番茄内源miRNA159的成熟序列中，创建了一种特异性针对CMV复制酶的抑制分子。这种改造后的miRNA被连接到载体pBI121上，通过根癌农杆菌介导，成功地转化到番茄Micro Tom植株中。 实验过程包括PCR和Southern blotting验证，即通过检测目的基因的转录产物和染色体水平的整合情况，确认人工microRNA已经导入并稳定表达。结果显示，转基因番茄再生株表现出正常的生长，而非转基因叶片则显示出叶片畸形和花叶症状，这表明人工microRNA已经实现了对CMV复制酶的有效沉默，从而增强了番茄对CMV的抗性。 关键词“植物保护”、“microRNA”和“转基因番茄”强调了这项研究对于提升植物对病毒性疾病防控的重要意义，以及它在基因工程技术中的应用前景。通过这一方法，科学家们有望开发出更有效的植物抗病毒策略，为农业生产提供新的生物防治手段。同时，这也为其他作物的基因改良和疾病防控提供了新的思路和技术路线。