CASK在αTC-6细胞胰高血糖素分泌中的功能研究

本文主要探讨了CASK在αTC-6细胞分泌胰高血糖素过程中的作用。研究由王天元和王尧两位作者合作进行，他们隶属于东南大学医学院和附属中大医院内分泌科，其中王天元专注于糖尿病发病机制的研究，而王尧则是一位经验丰富的主任医师和博士生导师。研究得到了国家自然科学基金（81570409）的支持。 首先，实验通过体外培养αTC-6细胞，采用实时定量PCR、western blot和免疫荧光技术确认了CASK在胰岛α细胞，即αTC-6细胞中的表达。这些方法被用来验证CASK作为分子在该细胞类型中的存在，并且可能与胰高血糖素的分泌过程相关联。 接着，研究者设计并应用小分子RNA干扰片段（siRNA）来转染小鼠胰岛α细胞系的αTC-6细胞。siRNA的主要目的是特异性地下调CASK基因的表达，以便观察其对胰高血糖素分泌的影响。经过一段时间（如48小时）后，实时定量PCR和Western blot分析显示，当CASK基因表达显著降低（P<0.01）时，这表明CASK的沉默对基因表达有显著抑制作用。 实验的核心部分是通过放射免疫法测定ATP刺激下的αTC-6细胞胰高血糖素分泌量的变化。结果显示，当CASK被干扰后，ATP刺激引起的胰高血糖素分泌量明显减少（P<0.05），这直接证明了CASK对于胰高血糖素分泌具有调节作用，可能是通过影响αTC-6细胞的信号传导通路实现的。 总结来说，本研究揭示了CASK在胰岛α细胞αTC-6中具有实际的生物学功能，且通过RNA干扰技术调控CASK表达可以影响ATP诱导的胰高血糖素分泌。这对于理解糖尿病及其相关胰腺功能异常的机制提供了新的见解，也为未来开发针对CASK的干预策略，如药物或基因疗法，治疗糖尿病提供了潜在的基础。