利用FQ-PCR检测孕妇外周血胎儿细胞含量：方法与阳性率

该论文标题《应用VQ-PCR检测孕妇外周血中胎儿细胞含量 (2008年)》发表于2008年4月的《四川大学学报(自然科学版)》增刊，主要探讨了利用分子生物学技术在临床医学领域中的一个实用方法。研究者们设计了一种创新的实验策略，即通过合成特异性引物和TaqMan探针，结合荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）来测定孕妇外周血中胎儿细胞的含量。 论文的核心内容聚焦于利用GAPDH和SRY这两对基因来进行检测。GAPDH是一对常染色体上的基因，而SRY则是Y染色体上的单拷贝基因。研究人员首先针对这两种基因分别设计了特异性引物，确保只扩增目标序列。然后，他们将等量的DNA样本加入到含有这两种引物和TaqMan探针的PCR反应体系中，通过荧光信号的变化实时监测扩增过程，从而得到GAPDH和SRY基因的定量值。 实验结果显示，即使在30微升的FQ-PCR反应体系中加入极少的正常男性基因组DNA（大约0.05ng），也能确保扩增曲线的稳定性。在60例临床孕妇外周血样本的实验中，有58.3%（35例）显示出SRY基因的扩增阳性的结果，这表明这些样本中含有胎儿细胞。GAPDH基因的Ct值（循环阈值，反映模板的数量）范围在20-22之间，而SRY基因的Ct值则在33~40，这为胎儿细胞的相对丰度提供了进一步的定量依据。 通过计算GAPDH和SRY基因的比值，研究人员可以得出孕妇血液中胎儿细胞的含量范围，具体在11104至11106之间。这种方法对于产前诊断、遗传疾病筛查以及胎盘功能评估等领域具有潜在的应用价值，因为它提供了一种非侵入性的方法来估计胎儿的遗传成分，有助于孕期的健康管理。 论文的关键词包括“母血中的胎儿细胞”、“荧光定量聚合酶链反应”和“SRY基因”，这些都是理解论文核心内容的关键术语，表明研究的焦点在于通过精确的分子生物学技术来测量孕妇血样中胎儿细胞的存在和数量，这对于临床医学研究和实践具有重要意义。