龙眼DlCLV2基因克隆与表达分析:在体胚发生和激素响应中的角色

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"龙眼胚性培养物DlCLV2基因的克隆与表达分析" 本文是关于龙眼(Dimocarpus longan)胚性培养物中DlCLV2基因的研究,由张冬敏、田奇琳等人发表,属于首发论文。研究团队运用RT-PCR(反转录聚合酶链式反应)和RACE(快速扩增cDNA末端)技术,成功克隆了龙眼的CLV2基因全序列,并将其命名为DlCLV2,该基因的GenBank登录号为KM410158。 DlCLV2基因编码的蛋白质属于LRR-RLPs(富含亮氨酸重复的受体样蛋白)家族,具有典型的结构特征,包括20个完整的亮氨酸重复序列的细胞外域、10次跨膜结构域以及一个由12个氨基酸组成的细胞内短尾结构。通过生物信息学分析,研究人员发现DlCLV2在植物进化中与柑橘属的脐橙亲缘关系最近,两者在系统发育树上聚为同一分支。 进一步的实验揭示了DlCLV2基因在龙眼体细胞胚胎发生过程中的表达模式。实时荧光定量PCR结果显示,DlCLV2基因在5个不同的体胚阶段都有表达,特别是在球形胚阶段表达量显著高于其他时期,这表明DlCLV2可能在球形胚形成阶段起关键作用。此外,DlCLV2基因在龙眼的不同活体组织中表现出组织特异性表达,根部和果肉中表达量较高。 研究还探讨了激素对DlCLV2表达的影响。IAA(生长素)处理后,DlCLV2表达上调,显示出生长素可以诱导DlCLV2的表达;相反,NPA(奈乙酸)和PP333处理导致其表达下调,表明这两种物质可能抑制DlCLV2的活性。此外,低浓度的KT(激动素)处理降低了DlCLV2的表达,这提示外源细胞分裂素可能负向调节DlCLV2的转录。 DlCLV2基因在龙眼胚胎发育及激素调控网络中扮演着重要角色,其表达模式与体细胞胚胎发生和植物激素信号传导紧密相关。这一研究为进一步理解龙眼胚胎发育的分子机制,以及植物干细胞维持和分化的遗传调控提供了新的见解,对于龙眼的遗传改良和生物技术应用具有理论和实践意义。