第 卷第 期
年 月
中山大学学报 自然科学版
ACTASCIENTIARUMNATURALIUMUNIVERSITATISSUNYATSENI
VolNo
Sep
活体小鼠脑组织 Ca
敏感荧光染料双光子成像的观察
彭诗宇
任振华
徐金勇
顾怀宇
李光武
安徽医科大学神经生物学研究所 安徽 合肥
安徽医科大学人体解剖学教研室 安徽 合肥
中山大学中山医学院人体解剖学教研室 广东 广州
摘要
使用双光子激光共聚焦显微镜对活体小鼠脑组织 体感皮层 进行形态学和细胞内 Ca
变化水平的
观察和记录 方法是对小鼠开颅后向脑内注射 Ca
敏感荧光染料 Oregon Green BAPTA 乙酰氧基甲酯 然
后在双光子显微镜下观察并记录 双光子显微镜下的图像清晰生动 可扫描到大脑皮层以下较深区域 并能检
测神经元细胞内 Ca
离子即时水平变化 实验结果表明通过注射 Ca
敏感荧光染料并结合多光子激光共聚焦显
微镜观察活体动物脑部变化的方法可以得到高分辨率图像并且作为分析的来源
关键词
活体脑成像 双光子激光共聚焦显微镜 Ca
敏感染料 体感皮层
中图分类号
Q Q R
文献标志码
A
文章编号
Research on Ca
Sensitive Fluorescent Indicators for
TwoPhoton Brain Imaging in Live Mouse
PENG Shiyu
XU Jinyong
REN Zhenhua
GU Huaiyu
LI Guangwu
Institution of Neurobiology Anhui Medical University Hefei Chian
Department of anthropotomy Anhui Medical Unoversity Hefei China
Department of anthropotomy Sun Yatsen UniversityGuangzhou China
Abstract To observe the brain image and the change of Ca
level in live mouse by using twophoton la
ser scanning confocal microscopeUsing craniotomy to expose target area of mouse brain somatosensory
cortex then inject Ca
sensitive fluorescent indicator for instance Oregon Green BAPTA ace
toxymethylAfter that depose the mouse under the twophoton to observe and recordThe brain image
record by twophoton is clear and vivid And photograph indicate that by using twophoton confocal can
reach deeper area of the brain and record the fast change of Ca
in single neuronThe results show that
by using multiphoton confocal microscope couple with calcium sensitive fluorescent indicator can get high
resolution image of brain of live mouse
Key words brain image in vivo Twophoton laser scanning confocal microscope Ca
sensitive dye
somatosensory cortex
现代神经生物学的一大挑战就是如何对活体动
物大脑进行有效的成像观察与记录 长期以来 对
动物脑组织结构的观察多数停留在形态学染色的层
面上 这类方法虽然有效 但对于活动脑组织的观
察却无能为力
也有许多有效观测活体动物脑
组织的方法 如细胞内和细胞外的电生理记录 功
能性核磁共振 Functional Magnetic Resonance Im
age FMRI
正电子发射计算机扫描 Position
Emission Tomography PET 等 但这些方法普遍
脑损伤偏大或时间空间分辨率偏低的缺点 近年来
收稿日期
基金项目 国家自然科学基金资助项目
作者简介 彭诗宇 年生 男 硕士研究生 通讯作者 李光武 Email guangwulisinacom