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首页甲基营养型假单胞菌J-12诱变选育高产L-丝氨酸菌株
本文主要探讨了甲基营养型-L丝氨酸产生菌的选育方法,发表于2009年的《中国生物加工过程》杂志第7卷第3期。研究者以假单胞菌J-12为出发菌株,这是一种具有甲基营养特性的细菌,该菌株在生物技术领域中常用于生产氨基酸等代谢产物。研究人员采用了化学诱变技术,即利用硫酸二乙酯(DES)和亚硝基胍(NTG)对菌株进行诱变处理,这些化合物可以引起DNA序列的改变,从而产生新的变异类型。 诱变处理后的菌株经过定向筛选,重点是在含有D丝氨酸结构类似物的平板和高浓度甘氨酸的平板上进行选择。D丝氨酸是一种类似L-丝氨酸的氨基酸,通过这种筛选,研究人员希望能够得到对L-丝氨酸合成有优势的菌株。经过这一过程,他们成功地获得了高产菌株N-13,其发酵性能显著优于原出发菌株J-12,L-丝氨酸的产量提高了97.9%。这意味着菌株N-13具有更高的L-丝氨酸合成效率和生产能力。 在优化的培养条件下,即含有20克/升的甘氨酸和7毫升/升的甲醇的培养基中,L-丝氨酸的积累量可达到4.81克/升,这是一个重要的突破,因为高浓度的L-丝氨酸是许多工业应用中的宝贵原料,如食品、饲料添加剂、医药和化妆品等领域。 这项研究不仅提供了改进菌种选育的方法,也为L-丝氨酸的工业化生产提供了新的可能性,对于微生物发酵技术的优化和生物工程技术的发展具有重要意义。同时,它也展示了化学诱变作为一种有效工具在生物技术中的应用,能够帮助科学家们定向改良微生物以适应特定的代谢需求。
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第 卷第 期
年 月
生物加工过程
收稿日期:
作者简介:张超(—),男,山东济南人,硕士,助教,研究方向:发酵工学,:
甲基营养型 L 丝氨酸产生菌的选育
张超,栾兴社,张维建,侯书国
(山东建筑大学市政与环境工程学院,济南 )
摘要:以甲基营养型假单胞菌 为出发菌株,经硫酸二乙酯()和亚硝基胍()诱变处理,D 丝氨酸
结构类似物平板和高浓度甘氨酸平板定向筛选,获得 株 L 丝氨酸高产菌 ,其发酵液中 L 丝氨酸产量较出
发菌株提高 。在含有 甘氨酸和 甲醇的培养基中,L 丝氨酸积累可达 。
关键词:假单胞菌;化学诱变;育种;发酵;L 丝氨酸
中图分类号:文献标志码:文章编号:()
BreedingofL-serineproducingmethylotrophmutant
,,,
(,,,)
Abstract:LPseudomonas,
NNN()()
DL
L
Keywords:Pseudomonas;;;;L
L 丝氨酸作为一种生化试剂,在食品、饲料、医
药、农业中广泛应用,特别是应用于配制第三代复
方氨基酸输液及营养增补剂。利用它合成多种丝
氨酸衍生物,在抗癌、抗艾滋病新药及基因工程用
保护氨基酸等方面意义重大。此外,因 L 丝氨酸具
有特殊的保湿性,被大量用于高级化妆品
[]
。
L 丝氨酸的生产方法主要有:蛋白质水解法、
化学合成法、微生物发酵法和酶法。蛋白质水解法
和化学合成法都存在损失率大、综合利用率差、成
本高等缺陷。目前主要应用微生物发酵法来生产
L 丝氨酸
[]
。
国内利用微生物发酵法生产 L 丝氨酸的研究,
大多集中在基因工程菌或以甘氨酸为前体进行发
酵生产
[]
等方面。笔者从土壤中筛选到一株甲基
营养型 L 丝氨酸生产菌 ,以 为出发菌
株,通过硫酸二乙酯(
)和亚硝基胍()逐级
诱变处理和选育,赋予其特定遗传标记,进一步提
高其产酸水平。
1 材料与方法
1.1 材料
出发菌株
假单胞菌(Pseudomonas) ,由本实验室分
离得到。
主要试剂
D 丝氨酸为美国 公司产品;甘氨酸为上
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