重组大肠杆菌BL21(pUC19-Hyp)发酵工程：恒速流加补料分批培养羟脯氨酸

重组大肠杆菌BL21(pUC19-Hyp)产羟脯氨酸的补料分批培养 本研究中，作者使用重组大肠杆菌BL21(pUC19-Hyp)为出发菌株，在7L发酵罐中，运用间歇流加、指数流加、恒速流加三种流加碳源的方式进行补料分批培养。结果表明，以0.3g/min恒速流加为最优，在发酵开始44h时羟脯氨酸(Hydroxyproline，Hyp)的浓度达到最高，浓度为42.50g/L，脯氨酸（Proline，Pro）转化率为81％，此时细胞干重为21.33g/L，残糖浓度为0.17g/L。 本研究的关键技术点在于使用重组大肠杆菌BL21(pUC19-Hyp)作为出发菌株，并运用不同的流加碳源方式来进行补料分批培养。其中，恒速流加方式的应用使得羟脯氨酸的产量达到最高，且脯氨酸的转化率也达到81％。此外，本研究还表明，发酵过程中消耗的葡萄糖与产生的Hyp质量之比约为4:1。 在发酵过程中，氨基酸分析结果表明，除Pro、Hyp外的其他氨基酸含量均低于1mg/L，发酵液中主要氨基酸为Pro和Hyp。这表明本研究中的发酵过程主要生成羟脯氨酸和脯氨酸两种氨基酸。 本研究的结果表明，使用重组大肠杆菌BL21(pUC19-Hyp)作为出发菌株，并运用恒速流加方式进行补料分批培养，可以高效地生产羟脯氨酸。这项技术可以应用于工业生产中，提高羟脯氨酸的产量和纯度。 关键词：发酵工程；重组大肠杆菌；羟脯氨酸（Hyp）；恒速流加 技术要点： 1. 重组大肠杆菌BL21(pUC19-Hyp)作为出发菌株，可以高效地生产羟脯氨酸。 2. 恒速流加方式可以提高羟脯氨酸的产量和纯度。 3. 发酵过程中消耗的葡萄糖与产生的Hyp质量之比约为4:1。 4. 氨基酸分析结果表明，除Pro、Hyp外的其他氨基酸含量均低于1mg/L，发酵液中主要氨基酸为Pro和Hyp。 本研究提供了一种高效生产羟脯氨酸的方法，具有重要的理论和实践价值。