制备与鉴定抗弓形虫SAG1单克隆抗体

"抗弓形虫SAG1单克隆抗体的制备" 本文详细阐述了如何制备抗弓形虫SAG1蛋白的单克隆抗体，这一过程对于研究不同毒力虫株具有重要意义，因为SAG1蛋白在其各毒力株间表现出良好的功能保守性。研究团队由刘钊、卓洵辉等人主导，他们利用原核表达系统产生的SAG1重组蛋白作为免疫原，对BALB/c小鼠进行免疫接种。 在免疫过程中，小鼠的脾脏细胞被取出并与SP2/0细胞系进行融合，目的是生成杂交瘤细胞，这些细胞能够稳定分泌特异性识别SAG1蛋白的抗体。经过四次亚克隆筛选，研究人员成功得到了8株能够与重组SAG1蛋白特异性结合的单克隆抗体分泌株，分别命名为2D8、2G2、3G12、4B7、4H8、5A2、6E1和7C1。 接下来，研究人员通过ELISA检测这些抗体对虫体可溶性蛋白和SDS溶解的虫体蛋白的识别能力，发现其中的4B7株抗体能够识别虫体蛋白。进一步的分析表明，4B7抗体属于IgG1亚型，其滴度高达1:3200。通过Western Blot技术，确认4B7抗体与重组SAG1蛋白有良好的反应性，这意味着4B7能够特异性地识别并结合SAG1蛋白。 这项研究的成果，即4B7单克隆抗体，为弓形虫病的研究提供了重要的工具，尤其是在比较不同毒力虫株之间的差异或研究SAG1蛋白在感染进程中的作用时。此外，该抗体可能也有潜力应用于弓形虫的诊断试剂开发，提高检测的特异性和敏感性。 关键词：弓形虫；单克隆抗体；SAG1 此项研究受浙江省重点科技创新团队项目(2012R10031-14)和浙江省重大科技专项(2012C12009-2)资助。通讯联系人杜爱芳教授，专注于寄生虫分子病理生物学领域的研究。此篇论文为首发论文，发表于《中国科技论文在线》。