家蚕BmLZM溶菌酶融合多角体的表达、纯化与活性研究

"家蚕溶菌酶BmLZM融合多角体的表达、纯化及活性检测" 本文详细探讨了家蚕溶菌酶BmLZM的融合表达、纯化及其生物活性的检测过程。溶菌酶（LZM）作为一种多功能的天然蛋白质，在非特异性免疫系统中扮演着重要角色，它具有抗菌、抗炎以及增强免疫力等多重功能，并且没有明显的毒副作用，因此在医药和生物技术领域有着广阔的应用潜力。 在研究中，科研人员首先从实验室构建的家蚕cDNA文库中鉴定出一条与人类LZM蛋白有38%同源性的序列，将其命名为BmLZM。为了实现该基因在大肠杆菌中的高效表达，科研团队将BmLZM基因与多角体基因（polyhedrin, Polh）进行融合，并在两者之间插入凝血酶（thrombin, Thb）的核酸序列。他们将融合后的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)，以诱导表达重组融合蛋白。 纯化过程中，研究人员利用多角体蛋白的溶解特性，通过调整蛋白缓冲液的pH值和离心技术来分离纯化重组蛋白。接着，他们使用凝血酶进行酶切，再通过离心和超滤步骤，成功地得到了纯化的BmLZM蛋白。 为了验证BmLZM的抗菌活性，科研人员采用了琼脂平板扩散法，通过观察溶壁微球菌的抑菌圈来判断其活性。结果显示，纯化出的BmLZM蛋白具有显著的抑菌效果。进一步通过溶壁微球菌比浊法，他们计算出BmLZM的平均质量酶活为334.75U/mg，这表明BmLZM具有很高的生物活性。 这项研究基于多角体表达技术，成功地融合表达了具有生物活性的BmLZM，为家蚕溶菌酶的基础研究和实际应用提供了坚实的理论基础和技术支持。该成果可能推动家蚕生物反应器在医药生产中的应用，特别是在生产具有免疫调节和抗菌效果的生物制品方面。同时，这种方法也为其他昆虫生物反应器的研究提供了新的思路。