构建并验证ProINS(7pep)-LE-ELP胰岛素类似物的表达与活性

本文《胰岛素类似物ProINS(7pep)-LE-ELP的表达、纯化与活性初探》由赵晨红、宫燚和刘青青合作完成，发表在中国科技论文在线。研究的主要目的是构建一个原核表达系统，用于生产ProINS(7pep)-LE-ELP融合蛋白，这是一种潜在的新型胰岛素类似物。ProINS(7pep)是一种已知的胰岛素片段，而LE-ELP是一种特异性标签，它被设计用于易于蛋白质的纯化。 研究者首先将ProINS(7pep)-LE-ELP基因片段整合到pET28α-MCS载体上，这是一种广泛使用的表达平台。随后，他们将重组基因转移到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达，利用ELP标签的特性来纯化目标蛋白。ELP标签技术允许通过特定的条件实现蛋白的高效分离和纯化。 实验结果显示，在BL21(DE3)宿主细胞中成功表达了ProINS(7pep)-LE-ELP融合蛋白，其分子量约为45千道尔顿。进一步的生物活性测试表明，纯化的蛋白能够有效降低实验小鼠的血糖水平，并且表现出剂量依赖性，即随着注入剂量的增加，降糖效果增强。 这项研究为新型胰岛素类似物的开发提供了关键的实验证据，特别是对于治疗I型糖尿病具有潜在价值。通过分子生物学技术，研究人员不仅构建了一个稳定的表达系统，还验证了ProINS(7pep)-LE-ELP融合蛋白的实用性和生物活性，为未来的药物研发奠定了坚实的基础。 关键词包括：分子生物学、ProINS(7pep)-LE-ELP融合蛋白、蛋白质表达、可逆相变循环以及I型糖尿病。该研究不仅关注基础科学，还具有实际应用意义，展现了将基础研究转化为临床实践的可能性。总体来说，这是一篇在胰岛素类似物领域具有开创性的科研成果。