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首页6种寄主桃蛀果蛾的RAPD遗传变异分析:多态性研究与亲缘关系
本文主要探讨了6种寄主桃蛀果蛾(包括苹果、梨、杏、酸枣、枣和山楂寄主)的遗传变异分析,采用的是随机扩增多态DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)技术。在2001年的研究中,研究人员使用了25种随机引物对这些寄主的桃蛀果蛾基因组DNA进行了分析,结果显示,有22种引物表现出不同程度的DNA多态性,多态性百分比高达71.9%,显示出这些寄主间存在显著的遗传多样性。 遗传距离是衡量物种或群体之间遗传相似性的关键指标,通过Nei片段共享度公式计算得出,6种寄主桃蛀果蛾之间的平均遗传距离为0.5426。其中,梨桃蛀果蛾与酸枣桃蛀果蛾的遗传距离最大,为0.704,而枣与酸枣之间的遗传距离最小,为0.4627。这种差异反映了它们在进化过程中的分化程度。 研究者采用了UPGMA(Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean,系统聚类法)来构建分子聚类图,这是一种用于生物学分类的方法,可以直观地展示出不同寄主桃蛀果蛾之间的亲缘关系。这个聚类图有助于理解不同寄主环境对桃蛀果蛾种群遗传结构的影响,以及可能存在的隔离和遗传分化现象。 这项研究的重要性在于,它利用了分子标记技术——RAPD-PCR,对桃蛀果蛾的遗传变异进行了深入研究,这对于理解它们的生态适应性、种群动态以及跨寄主的遗传交流具有重要意义。通过对不同寄主桃蛀果蛾的遗传差异分析,可以为制定针对性的防治策略提供科学依据,帮助减少果树上的经济损失,提高农业生产效率。同时,这也展示了分子生物学技术在昆虫遗传学研究中的应用价值,为未来的害虫管理提供了新的视角和工具。
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资源推荐
第
29
卷第
3
期
2001
年
6
月
西北农林科技大学学报(自然科学版〉
Vo
l.
29
No.3
June
2001
Jour.
of
Northwest
Sc
i-Tech Univ.
of
Agri.
and
For. (Nat.
Sc
i.
Ed.)
6
种寄主桃蛙果峨遗传变异的
RAPD
分析
韩青梅
1
,花蕾
2
[摘
要]
用
25
种随机引物对苹果、梨、杏、酸枣、枣、山植
6
种寄主桃蛇果峨基因组
DNA
进行
7
随机扩增多
态
DNA(RAPD)
分析,结果表明
.25
种随机引物中有
22
种出现不同程度的
DNA
多态性标记,多态百分比为
7
1.
9%
。根据
Nei
民片段共享度公式计算了
6
种寄主桃蛙果娥两两配对间的遗传距离
.6
种寄主桃蛙果峨的平均遗
传距离为
0.542
6.
其中梨桃驻果娥与酸枣桃蛙果峨遗传距离最远为
0.704.
枣与酸枣遗传距离最近为
0.462
7.
用
UPGMA
法构建了
6
种寄主桃蛙果娥的分子聚类图。
[关键词]
桃驻果峨,
RAPD-PCR
,遗传变异
s
寄主
[中固分类号
J
Q969.
42+9.
5
[文献标识码
J
A
[文章编号
JI000-2782(2001)03-091-04
挑蛙果峨又名桃小食心虫,简称"挑小",隶属于
鳞翅目果蛙峨科,是我国北方地区多种果树上的重
要害虫,其寄主多,分布广,危害严重,对寄主果实的
质量和产量均造成严重的损失。桃蛙果峨在不同寄
主上的发生代数,越冬幼虫出土和成虫出现时期,幼
虫脱果滞育时期等均有明显差异口
~4]
,这可能会导
致不同寄主上的挑蛙果峨种群间基因交流降低,并
出现遗传分化[气分子标记能够为种群内与种群间
的变异提供更多的信息。
RAPD
作为一种分子标
记,用单个随机引物对基因组
DNA
进行扩增,可揭
示种群的多态性归。该技术灵敏度高,操作简单,试
验材料要求较少且要求不高(新鲜、干制标本均可),
不需要放射性标记,特别是对种群的遗传背景了解
不多或根本不了解时更适用。本研究的目的是用
RAPD
标记来探讨不同寄主挑蛙果峨的遗传分化
及亲缘关系,以期对不同寄主挑蛙果峨的综合防治
提供理论依据。
1
材料与方法
1.
1
试虫来源
所用的挑蛙果峨均是在不同寄主果树上用挑蛙
果峨性诱芯诱到的成虫,带回室内后凉干于一
22
'C
保存(诱峨时不同寄主果树至少相距
500
m
以上〉。
挑蛙果峨的诱集分别在陕西的乾县、澄城进行。
1.
2
基因组
DNA
的提取
用上海生物工程技术公司提供的基因组
DNA
[收稿日期]
2000-07-11
f
基金项目]
国家自然科学基金资助项目
小量抽提试剂盒,提取时,将不同寄主挑蛙果峨成虫
分别随机选取
4
个置于1.
5
mL
离心管中液氮研成
粉末,用
100μLTE
缓冲液悬浮后加人
200μL
细胞
裂解液,混匀后加人1.
5μL
蛋白酶
K
,置于
55
'C
水
浴
30
min
后加
300μL
氯仿,用台式离心机
(1
0000
r/min)
离心
2
min
,取上清液
300μL
置于
元菌1.
5
mL
离心管中,分别加
300μL
悬浮液混
匀,室温放置
2
min
后,高速
00
000
r/min)
离心
2
mln
,吸掉溶液后立即加
100μL
1.
2
mo
l/
L NaCl ,
轻轻振荡至样品完全溶解,再加1.
5μL
RNase
A
酶混匀,置
55.C
水浩
5"'-'10
min
,加人
300μL
冷乙
醇,一
20.C
放置
30
min
后取出
10
000
r/min
高速
离心
5min
,倒掉乙醇,用等体积
700
mL/L
的乙晖
洗
1"'-'2
次倒置于干净的滤纸上,室温干燥
10
min ,
用
50μLTE
溶解后置一
22.C
保存备用。
1.
3
反应引物
所用引物从上海生物工程技术公司引物中选取
10
碱基随机引物
25
个,引物及其序列见表
1
。
1.
4
DNA
扩增
扩增反应液含引物
15
吨,模板
DNA
20
吨,
100
mmo
l/
L
Tris-HCl
(pH
8.
3)
,50
mmo
l/
L
KCl.
2
mmo
l/
L MgCI
2
, 1
g/L
BSA
(牛血清蛋白)
,
'200μmo
l/
L
dNTP
,
3μmo
l/
min
Taq
DNA
聚合酶,
反应总体积
25μL
,反应混和物用
25μL
石蜡油覆
盖。扩增在
DNA
Thermal
cycler
96DTC-3C
基因扩
增仪上进行,条件为
94
'C
变性
3
min.
然后进行
45
[作者简介]
韩青梅
0968
一)
.女,陕西横山人,讲师,在读博士生,主要从事植物保护研究.
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weixin_38520437
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