对硫磷免疫检测法：单克隆抗体与ic-ELISA技术

"对硫磷的免疫快速检测技术的开发与应用" 本文主要介绍了对硫磷的免疫快速检测方法，特别是基于单克隆抗体的间接竞争酶联免疫吸附分析（ic-ELISA）技术。该技术对于食品安全监测和环境污染物检测具有重要意义，因为它能够快速、灵敏地检测出对硫磷这种有毒的有机磷农药。 首先，研究人员通过化学偶联方法制备了对硫磷的半抗原与蛋白质载体，如牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）的结合物，作为免疫原和包被原。具体来说，他们利用碳二亚胺法（EDC）和活泼酯法（DCC）这两种化学反应来实现半抗原与蛋白质的连接，确保半抗原的有效结合并保持其免疫活性。 接下来，使用免疫原免疫Balb/c小鼠，然后将脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，以产生能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株2G11。这种杂交瘤细胞能够持续产生针对对硫磷的单克隆抗体，是ic-ELISA技术的核心。 建立的ic-ELISA方法表现出高灵敏度，抑制中浓度为2.02ng/mL，检测线性范围宽，达到0.88ng/mL～4.60ng/mL。这表明该方法能够准确检测极低浓度的对硫磷。此外，抗体显示出良好的特异性，对相关化合物如蝇毒磷、喹硫磷、辛硫磷、三唑磷、除线磷的交叉反应率小于5%，避免了干扰。 在实际应用中，该方法对添加到不同基质（可能包括食品和环境样本）中的对硫磷进行检测，回收率在93%～111%之间，变异系数在1.39%～7.11%，显示了良好的重复性和可靠性。这证明了ic-ELISA方法在实际样品检测中的适用性和实用性。 关键词：对硫磷，单克隆抗体，酶联免疫吸附分析（ELISA） 文章归属：科学技术文献分类号TS201.6，领域涉及食品安全检测技术和环境污染物监测。 对硫磷的免疫快速检测技术是基于单克隆抗体的ic-ELISA方法，具有高灵敏度、高特异性和良好的重复性，对于保障食品安全和环境保护具有重要作用。这种方法的建立和发展，为有机磷农药残留的快速检测提供了新的工具和策略。