"基因工程技术:基因改造和质粒分离的实践指南"

0 下载量 156 浏览量 更新于2024-01-03 收藏 4.21MB DOC 举报
基因工程技术是一种通过对生物体进行基因的改造和重组来实现生物属性的改变的技术。该技术采用体外DNA重组和转移等方法,按照人们的愿望进行严密的设计,旨在改变现有物种的性状,使其在较短时间内趋于完善,并创造出新的生物类型。 质粒是一种存在于染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链的闭合环状DNA分子,以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒具有自主的复制和转录系统。质粒在细胞内的复制一般分为紧密控制型和松弛控制型。紧密控制型质粒只在细胞周期的特定阶段进行复制,通常每个细胞内只含有一个或几个质粒分子;而松弛控制型质粒可以在整个细胞周期中随时复制,每个细胞中都有许多拷贝。 质粒的不相容性是指共用同复制系统的不同质粒无法在同一宿主细胞中共存。这是因为质粒在复制过程中会占用细胞的资源和能量,如果宿主细胞同时容纳了多个质粒,将会导致资源的浪费和竞争,可能对细胞的正常功能产生不利影响。 从细胞中分离质粒DNA的方法通常包括三个基本步骤。首先,需要培养细菌,使质粒扩增。其次,收集并裂解细胞,以释放质粒DNA。最后,通过分离和纯化的方法得到纯净的质粒DNA。在这个过程中,常用的方法包括使用溶菌酶破坏菌体细胞壁,以及使用SDS和Triton X-100来使细胞膜裂解,以释放质粒DNA。 染色体DNA通常用于构建基因组文库和Southern杂交等实验。基因组DNA的提取是为了从生物体中得到其全部或部分的基因组DNA,以用于后续的实验和研究。基因组DNA提取的方法通常包括细胞裂解、蛋白质去除、DNA纯化等步骤。 总之,基因工程技术是一项开创性的技术,通过对生物体的基因进行改造和重组,可以实现生物性状的改变和创造新的生物类型。质粒作为一种重要的遗传因子,在基因工程技术中起到重要的作用。从细胞中分离质粒DNA和基因组DNA的方法为进行后续实验和研究提供了可靠的基础。基因工程技术的应用前景广阔,将为人类社会带来更多的科学和技术进步。