TALEN靶向Dmrt1基因敲除对罗非鱼精巢发育和减数分裂的影响

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Dmrt1基因敲除对罗非鱼精巢发育及减数分裂的影响 本研究使用Transcription activator-like effector nucleases(TALEN)技术对罗非鱼(Oreochromis niloticus)Dmrt1基因进行敲除,探讨Dmrt1基因在罗非鱼精巢发育和减数分裂中的作用。结果表明,TALEN技术能够高效地对Dmrt1基因进行编辑,包括删除不同碱基数目的突变类型。敲除Dmrt1基因的个体精巢组织学观察显示,精巢不能正常发育,无法正常启动减数分裂,精原细胞大量存在,部分退化区域甚至出现卵母细胞,未见曲细精管。免疫组化结果显示,Dmrt1敲除个体精巢中检测到芳香化酶的表达,而没有检测到胆固醇侧链裂解酶P450scc的表达。 本研究结果表明,Dmrt1基因在罗非鱼精巢的正常分化、发育以及精原细胞减数分裂起始中起重要作用。同时,本研究还表明,TALEN技术可以作为一种有效的基因敲除工具,用于研究鱼类基因功能。 知识点: 1. TALEN技术:是一种基因组修饰技术,能够高效地对目标基因进行编辑和敲除。 2. Dmrt1基因:是一种脊椎动物精巢分化和维持的关键基因,在鱼类精巢发育和减数分裂中起重要作用。 3. 罗非鱼精巢发育:是鱼类生殖系统的关键组成部分,Dmrt1基因敲除会影响罗非鱼精巢的正常发育和减数分裂。 4. 基因敲除技术:是一种研究基因功能的重要工具,能够通过敲除目标基因来研究其在生物体中的作用。 5. 免疫组化技术:是一种检测蛋白表达的技术,能够检测到蛋白在组织中的表达情况。 6. 芳香化酶:是一种合成雌激素的关键酶,在鱼类精巢发育和减数分裂中起重要作用。 7. 胆固醇侧链裂解酶P450scc:是一种参与激素合成的关键酶,在鱼类精巢发育和减数分裂中起重要作用。 本研究结果对鱼类生殖生物学、基因组修饰技术和基因功能研究等领域具有重要意义,为进一步研究鱼类生殖生物学和基因组修饰技术奠定了基础。