纳升级液滴阵列实时定量RT-PCR技术分析microRNA

"Nanoliter Droplet Array for Quantification of MicroRNA by Two-Step Real Time Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction" 这篇论文主要探讨了一种新的基因表达分析技术，即通过纳升级液滴阵列进行微小RNA（microRNA）的两步实时逆转录聚合酶链反应（Real-Time RT-PCR）定量分析。这种技术的创新之处在于其微流体系统，能够实现集成化、高灵敏度、低消耗和高通量的实时定量PCR，这对于生物学家来说具有显著的优势。 在过去的十年里，基因检测技术如PCR（聚合酶链反应）的微型化得到了广泛的研究，但现有的微型PCR设备，如基于液滴的PCR芯片和乳化PCR系统，通常设计用于在同一条件下进行多通道PCR反应，使用相同的引物和模板，这限制了它们在单plex（单标记）检测中的应用。论文中提到的6×6纳米级液滴阵列则打破了这一局限，它能可靠地并行执行实时RT-PCR，适用于单一目标的定量分析。 实时RT-PCR是一种常用的分子生物学技术，用于检测和定量特定RNA分子，包括microRNA。在该过程中，首先通过逆转录将RNA转化为DNA，然后进行PCR扩增，同时监测荧光信号以实时跟踪扩增过程。两步法RT-PCR是指先进行逆转录，然后再进行PCR扩增，这种方法可以提高检测的准确性。 纳升级液滴阵列的独特之处在于其微小的反应体积，每个液滴相当于一个独立的反应单元，大大降低了试剂消耗，同时由于反应区域的隔离，减少了交叉污染的可能性，提高了实验的精确度。此外，由于可以同时处理多个独立的液滴，因此该技术实现了高通量分析，可以在较短时间内获取大量样本的数据，这对于大规模基因表达研究或疾病诊断具有重要意义。 论文的作者团队包括张云霞、祝莹和姚波等人，他们来自浙江大学的微分析系统研究所和化学系。该研究得到了中国高等教育博士点专项科研基金的支持。通讯作者姚波是副教授，专注于生物分析化学领域，她的邮箱为 yaobo08@zju.edu.cn。 这篇“首发论文”介绍了纳升级液滴阵列技术在微小RNA定量分析中的应用，这一创新技术有望推动生物医学研究领域的进步，特别是在基因表达分析、疾病诊断和个性化医疗等方面。