中温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌高表达研究

该研究论文发表于2011年的天津科技大学学报，主要探讨了中温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达。标题《中温α-淀粉酶基因的克隆及在枯草芽孢杆菌中的高效表达》表明了研究的核心内容，即通过克隆Bacillus subtilis BF7658中的中温α-淀粉酶基因amy，并将其整合到高效表达载体pWB980中，以实现这种酶在枯草芽孢杆菌DB403中的高效表达。 作者刘逸寒等人，利用特定的科研基金支持，包括天津市科技攻关重点培育项目和天津科技大学自然科学基金，展示了严谨的科研过程。他们的研究结果显示，经优化的表达系统使得中温α-淀粉酶amy在DB403菌株中的活力达到了770单位/毫升，这是一个显著的表达水平，表明了这种基因改造的成功。 克隆后的重组酶经过多步纯化处理，其比活达到了35.8单位/毫克，纯化倍数为1.7，这表示纯化过程的高效性，同时得到的蛋白样品在凝胶电泳中呈现出单一的条带，进一步证实了酶的纯度。通过SDS-PAGE检测，确认了重组酶amy的相对分子质量为4.8×10^4 dalton。 酶学性质分析是研究的重点，结果显示，这种中温α-淀粉酶在60℃下表现出最佳反应温度，最适反应pH值为6.0，这些数据对于理解酶的活性条件以及在实际应用中的可能用途至关重要。 论文的关键词包括“枯草芽孢杆菌”、“中温α-淀粉酶”、“高效表达”、“纯化”和“酶学性质”，突出了研究的核心内容和目标。这篇论文为中温α-淀粉酶在工业发酵微生物中的应用提供了重要的基础，对于提高淀粉转化效率和优化生产过程具有潜在价值。