小菜蛾p53基因功能研究：克隆、表达与初步分析

"小菜蛾p53基因的克隆表达及其功能的初步研究" 这篇论文主要探讨了小菜蛾（Plutella xylostella）中的p53基因，这是一个关键的细胞应激因子，对于维持基因组稳定性具有重要作用。研究人员黄劲飞、刘向等人通过分子生物学技术对小菜蛾的p53基因进行了克隆和表达分析，旨在理解其在细胞应激和凋亡过程中的功能。 首先，他们成功克隆了小菜蛾的p53基因，全长2647碱基对（bp），编码区长度为1128bp，能够编码375个氨基酸。这个基因在Genbank上的登录号为KF991220。通过对序列的分析，研究者发现该基因在结构上具有保守性，并与其他物种的p53基因显示出一定的同源性。 接着，研究人员进行了小菜蛾p53基因的原核表达实验，表达出的蛋白大小约为40-44KD，与预期的分子量相符。他们还尝试使用昆虫表达载体在小菜蛾离体细胞中表达了这个基因。实验结果显示，过表达p53基因可以诱导下游凋亡基因reaper和gadd45的表达，但并未引发明显的细胞凋亡现象。 为了进一步研究p53基因在细胞凋亡中的作用，研究者应用不同凋亡诱导因素处理小菜蛾离体细胞。他们观察到p53基因在早期（2小时）有较高表达，但在中后期（6-12小时）表达量显著下降。同时，p53基因的表达模式呈现出在蛹期和成虫期高表达，而在卵期和老熟幼虫期表达较低的特点。 此外，论文还探讨了p53基因的负调控因子MDM2。MDM2在卵期表达量较高，成虫期较低，而在蛹期几乎不表达。通过计算机模拟，研究发现P53蛋白的C-端能够与MDM2的N-端结合，这表明两者之间存在相互作用。 这项研究不仅成功克隆了小菜蛾的p53基因并进行了表达，还初步揭示了它在细胞凋亡过程中的可能作用及与MDM2的调控关系，为理解小菜蛾的生理机制及可能的生物防治策略提供了理论基础。关键词包括：细胞凋亡、小菜蛾、p53基因、原核表达和真核表达。