![](https://csdnimg.cn/release/download_crawler_static/18168899/bg1.jpg)
山商大学学报{自然科学版
)35(1):126--129
,
2012
Journal of Shanxi University(Nat.
Sc
i.
Ed.
)
文章编号
:0253-2395(2012)01-0126-04
重组绿豆膜蛋白酶抑制剂片段
对肠癌细胞
SW480
迁移的影响
赵亚
~I
,李宗伟赵超付荣王兴华
2
,李卓玉
I
镰
(1.山西大学生物技术研究所.化学生物学与分子工程教育部重点实验室,山西太原
030006;
2.
山西大学生命科学学院,山西太原
030006)
摘
要:探讨重组且是蛋白酶抑制剂活性片段
(LysGP33)
的抗肠癌效应.大肠杆菌Jf.核农达
LysGP33
活性片段,
GST
亲和层析柱对表达蛋白进行纯化
.MTT
比色和细胞划痕方法检测
LysGP33
活性片段对
SW480
细胞增殖和迁移的
影响.结果农明
:10μmo
l/
L
LysGP33
活性片段对
SW480
细胞的增殖活性无明显影响,但能够有效地,抑制
SW480
细胞的迁移,并呈现,时间依赖效应.绿豆'矗蛋白酶抑制剂抑制了肠癌细胞的迁移,在抗肿瘪浸润和转移中具有一定
的应用前景.
关键词:绿豆胧蛋白酶抑制剂,细胞增殖
s
细胞迁移
中图分类号
:Q814
文献标识码
:A
肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,随着我国饮食结构的改变,其发病率呈逐年上升趋势
[1]
在肠癌死亡的
众多因素中,侵袭和转移是影响肠癌患者治疗和预后的重要因素,目前,虽然放射治疗和手术治疗可有效地
控制早期肿瘤,但是对于转移的肿瘤预后较差,因此,探寻一种有效的、非手术的、低毒的抑制肿瘤细胞侵袭
和转移的抑制剂对肠癌的治疗和预后有重要意义.
蛋白酶抑制剂具有广泛的生物学活性,在植物体内含量丰富,主要包含八种丝氨酸蛋白酶抑制剂家族和
一个半脱氨酸蛋白酶抑制剂家族
[2]
其中丝氨酸蛋白酶抑制剂由于其抗癌活性备受研究者的关注.膜蛋白酶
抑制剂属丝氨酸蛋白酶抑制,主要有
Kunitz
和
Bowman-Birk
两种类型,其中来源于大豆的Bo
wman-Birk
型
抑制荆对肠癌、前列腺癌、乳腺癌、骨肉瘤等多种肿瘤表现出了明显的抗癌活性
[3
飞豌豆Bo
wman-Birk
型膜
蛋白酶抑制剂可抑制结肠癌细胞的增殖
[6]
;莽麦膜蛋白酶抑制剂可通过诱导实体瘤细胞凋亡发挥抗癌作
用
[7]
膜蛋白酶抑制剂在抑制肿瘤细胞增殖,抗凋亡方面表现了良好的应用前景.
绿豆膜蛋白酶抑制剂全长
72
个氨基酸,属
Bowman-Birk
类抑制剂,有
Lys
和
Arg
两个活性中心,分别
具有抑制膜蛋白酶和膜凝乳蛋白酶的活性,目前对绿豆膜蛋白酶抑制剂在分离纯化和其生化活性方面的研
究较多间,但对其生物学活性研究较少.本研究为探讨绿豆膜蛋白酶抑制剂
Lys
活性片段
(LysGP33)
的抗癌
活性,原核表达了含有
LysGP33
的融合蛋白
GST-LysGP33.
体外研究该活性片段对肠癌细胞增殖和迁移的
影响,从而为制备研发与绿豆膜蛋白酶抑制剂相关的抗癌药物提供实验依据.
1
材料与方法
1.
1
材料
1.
1.
1
菌株与质拉
E.
coli
DH5a.
本室保存.重组质粒
pGEX-4
T-1-LysGP33
,由中科院上海生化所戚正武
院士馈赠.
1. 1.
2
细胞系
人结肠癌细胞系
SW480.
购于武汉博士德生物工程有限公司.
收稿日期
:2011-1
0-
21
;修回日期:
2011-11-15
基金项目:国家自然科学基金
(31040018);
山西省留学基金
(201
0-
2012)
;山西省国际合作项目
作者简介:赵亚草草
0981-}
,女,硕士研究生.备通讯联系人
s
李卓玉
0964-}
,女,数授.悔士生导师,主要从事细胞生物
学方面的研究.
E-mail:lzy@sx
u.
ed
u.
cn