"IPP分析系列教程三.pptx" 是一份关于如何使用IPP(Interactive Pathology Picture)软件进行免疫组化片子分析的教程。该教程详细介绍了如何进行批量测量宏程序的录制,以便于高效地分析免疫组织化学片子并导出数据。
1. 批量操作的注意事项:
批量宏操作的关键在于规划清晰的操作步骤,确保每一步都通过鼠标点击来完成。在录制宏之前,需要进行光密度矫正、选择测量区域、设置测量环境和选色文件,然后设置数据收集器。录制完成后,保存设置文件以便后续使用,最好保存在图片所在的文件夹中。
2. 光密度矫正:
光密度矫正是一项重要的预处理步骤,它通过在图片的空白区域点击来确定完全透光的零点,通常将Incident Level(入射光级别)设置为220。这有助于校准图像,确保后续分析的准确性。
3. 选择测量区域:
选择测量区域时,可以选择IOD(积分光密度)作为测量项目,并设定合适的面积过滤值(例如100),这个值可以根据实验需求进行调整。同时,设置测量区域的轮廓样式、标签样式、颜色等参数,如Outline Style为Filled,Label Style为Object#,Label Color为黄色。
4. 设置测量环境:
包括选择合适的测量项目、调整参数,如选择HSI色彩模式进行颜色选择。HSI分别代表色调(H),饱和度(S)和亮度(I)。根据实验的指标和图像效果,可以微调H、S和I的值。在调整后,将选色文件保存在同一文件夹内,便于再次使用。
5. 数据收集器设置:
设置数据收集器的布局,例如Layout,以便有效地记录和展示测量结果。同时,创建快捷键,调出选色文件和设置文件,确保数据收集过程顺畅。
6. 宏录制技巧:
在录制宏的过程中,需要注意调用选色文件的命令。如果宏中包含"rgb24.rge",则可能需要在代码编辑对话框中修改IPsepshow函数的参数,从2更改为1,以正确调用选色文件。同时,将子程序代码复制并替换原有代码,以确保宏的正确运行。
7. 实际应用与注意事项:
IPP分析教程不仅适用于基础医学院的研究生,也适用于任何需要进行免疫组化片子分析的科研人员。在录制和执行宏时,要确保每一步操作的准确性和一致性,以保证分析结果的可靠性。
这份IPP分析教程为用户提供了详细的操作指南,从基本的光密度矫正到复杂的宏录制,覆盖了免疫组化分析的多个关键环节。通过学习和实践这些步骤,用户可以提高分析效率,确保实验数据的精确性。