免疫组化半定量分析:IPP6.0照片拍摄技巧与灰度转OD值
需积分: 25 96 浏览量
更新于2024-08-22
收藏 19.4MB PPT 举报
在免疫组化半定量分析中,照片拍摄是关键步骤之一,尤其是使用IPP6.0这样的专业软件。拍摄的照片需要满足特定的要求,以便后续的定量分析。以下是关于如何利用Image-Pro Plus (IPP) 进行免疫组化图片分析的关键知识点:
1. **免疫组化分析原理**:
- 免疫组化通过检测样本中目标蛋白的染色信号来评估其含量,染色区域的面积与蛋白量呈正比,染色颜色深浅(光密度)与蛋白量的定量关系遵循朗伯-比尔定律,这是一种对数关系。
- **光密度与灰度的区别**:光密度是反映染色物质吸收光的量,与蛋白量直接相关,而灰度则是图像的亮度,代表像素的反射亮度。在实际应用中,光密度值通常用0-2.0或0-3.0表示。
2. **测量值转换**:
- 分光光度计、酶标仪和透射式显微镜照片中的光强度测量都使用OD值。而在荧光显微镜和电泳条带分析中,即使使用了荧光染料,由于处理方法类似,最终仍以荧光强度的光密度(即OD值)来定量。
- 照片数字化处理时,虽然使用的灰度数据,但最终分析结果需转化为OD值来表达蛋白质的浓度。
3. **标准样品的必要性**:
- OD值是一个无单位的相对值,需要通过标准曲线将OD值与样品的实际浓度关联起来。这通常在使用酶标仪或分光光度计时进行。
4. **照片分析实践**:
- 对于免疫组化照片的分析,应聚焦于特定染色区域的灰度值,通过计算得出组织切片的光密度值,这是定量分析的基础。
5. **软件工具**:
- IPP6.0作为专业图像分析软件,提供了处理这些数据的功能,包括图像的预处理、区域选择、灰度测量以及创建和校准标准曲线等。
总结来说,免疫组化半定量分析的照片拍摄不仅要求清晰度,还必须确保光密度值的准确性。使用IPP6.0进行分析时,理解并正确处理光密度与灰度的关系,建立标准曲线,是提高定量结果可靠性的重要环节。
728 浏览量
点击了解资源详情
点击了解资源详情
点击了解资源详情
点击了解资源详情
点击了解资源详情
点击了解资源详情
ServeRobotics
- 粉丝: 39
最新资源
- 如何利用SHDocVm.WebBrowser获取网页内容并保留空格
- 非响应式电子科技网站源码资源包及技术项目应用
- CapGemini学员Java项目:2021年3月核心实践
- 高清公鸡打鸣flash动画素材下载
- 使用RNN和Python实现Simpsons电视脚本生成
- PDM-EVARILOS: 实现室内本地化基准测试数据管理服务
- React应用快速入门与项目配置
- VC++实现基于图片尺寸的浏览器自适应功能
- RS232串口仿真工具包:调试与模拟全工具集
- 河马跳舞玩丝带的趣味Flash动画素材
- SU:实现级联链接的高效jQuery函数
- Adobe Acrobat Pro D2019官方中文版及补丁安装教程
- 开源Android应用:Booky McBookface电子书阅读器功能介绍
- 字符串操作练习:提升编程肌肉
- 应用于任意数据集的AdaIN样式迁移脚本发布
- 免费下载圆形齿轮旋转Flash动画素材