PCR-RFLP技术鉴定沙梨自交不亲和基因型及其新发现

本文研究了利用PCR-RFLP（Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorphism，聚合酶链反应-限制性片段长度多态性）技术来鉴定部分沙梨（Pyrus pyrifolia Nakai）品种的自交不亲和基因型，即S基因型。这项工作由辜青青、张青林等人进行，他们认为鉴定自交不亲和基因型对沙梨品种的选择和育种亲本组合具有关键作用。通过结合S基因的特异性PCR-RFLP技术以及人工授粉和S基因型信息，研究人员对中国本土的部分沙梨品种进行了S基因型的确认，并在此过程中发现两个新的自交不亲和等位基因，S38和S39。 PCR-RFLP技术是一种分子标记技术，它通过检测DNA序列中的特定限制性酶切割位点的变异，来确定遗传多态性。在沙梨中，自交不亲和性是由位于S位点上的复等位基因控制的，这些基因影响着花粉与柱头的相互识别，只有当花粉和柱头的S基因不匹配时，授粉过程才会正常进行。S-RNase基因是这一机制的关键，其保守区域和高变区的差异反映了不同S基因的多样性。 本文的研究方法包括田间授粉试验、蛋白质电泳分析、分子标记分析等传统方法，但重点集中在S基因特异性PCR分析，这是一种高效且精确的检测手段，已被广泛应用于苹果、扁桃、李、甜樱桃和梨等多种果树的S基因型鉴定。到目前为止，国外已经鉴定出了10个沙梨S基因，其中包括S1至S7在1946年由Terami等人鉴定，S8在2001年被发现，而S9和S10的鉴定则稍晚于这个时间点。 通过这项研究，科研人员不仅验证了S基因特异性PCR-RFLP技术在沙梨品种鉴定中的有效性，还为沙梨的遗传育种提供了新的基因资源，有助于提高沙梨的杂交效率和品质改良。这对于沙梨产业的发展具有重要的实际意义，能够促进优良品种的筛选和新品种的创制。