构建PPARδ基因RNAi慢病毒载体，稳定干扰结肠癌细胞株KM12C

该研究论文探讨了"PPARδ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及稳定干扰结肠癌细胞株KM12C的建立"这一重要课题。大肠癌作为全球常见且致死率高的恶性肿瘤，其发病机制复杂，其中过氧化物酶体增殖因子活化受体δ（PPARδ）被认为是结肠腺瘤性息肉基因通路的关键下游靶点，可能对癌症的发生起着重要作用。然而，尽管PPARδ在大肠癌中的具体功能尚待深入研究。 为了揭示PPARδ在大肠癌中的作用，研究者采用了一种先进的科研技术——慢病毒三质粒包装系统，构建了特异性针对PPARδ基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒载体。这种载体设计能够有效地抑制PPARδ基因的表达，从而达到稳定沉默的效果。构建的两种载体分别是编码PPARδ短发夹结构RNA（sh2PPARδ）的pLVshPPARδ载体和作为对照的pLVControl载体。 研究通过将慢病毒载体转导到结肠癌细胞株KM12C中，通过荧光显微镜和流式细胞术（FACS）验证了转染效率高达90%以上。通过RT-PCR检测发现，实验组（携带PPARδ干扰载体）的KM12C细胞中PPARδ mRNA表达降低了70%，而对照组和未处理细胞无明显差异，这表明干扰策略有效。此外，Western blot进一步确认了实验组PPARδ蛋白表达显著下降，对照组保持稳定，验证了RNAi技术在抑制PPARδ蛋白表达方面的有效性。 该研究成果不仅构建了一个稳定的PPARδ沉默的结肠癌细胞模型（KM12C），为后续深入研究PPARδ在大肠癌发生发展过程中的作用提供了宝贵的实验工具。同时，这一工作也为未来开发针对PPARδ的抗大肠癌疗法提供了潜在的策略。整个研究过程中，得到了国家自然科学基金、中国博士后科学基金和高等学校博士学科点专项科研基金的支持，显示出其在基础医学研究领域的学术价值。