罗伦隐球酵母处理樱桃番茄果实基因差异分析：揭示抗性分子机制

"该研究主要探讨了罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)诱导樱桃番茄果实差异表达基因的情况，以揭示其在增强番茄果实抗性方面的分子机制。通过抑制差减杂交技术构建了处理后的番茄果实cDNA文库，并筛选出大量阳性克隆进行测序和功能注释。研究发现，许多差异表达的基因可能参与了生防菌与番茄果实的交互过程，包括促分裂原活化蛋白激酶、丝氨酸蛋白酶、GTP结合蛋白、甘露醇脱氢酶和病程相关蛋白等。此外，这些基因在生物和非生物胁迫下的表达变化提示，生防菌可能通过上调这些基因的表达来增强果实对采后病害的抵抗力。" 在该研究中，研究人员首先介绍了水果采后病害对食品安全和环境的危害，以及化学杀菌剂的局限性。他们选择了罗伦隐球酵母作为生物防治手段，因为这种酵母具有拮抗真菌的能力，可能是替代化学杀菌剂的理想选择。 实验方法上，研究者利用樱桃番茄果实作为实验材料，通过抑制差减杂交(SSH)技术来识别处理前后基因表达的差异。SSH是一种有效的基因表达差异分析方法，可以富集和克隆那些在特定条件下上调或下调的基因。在这个过程中，他们构建了生防菌处理后的番茄果实cDNA文库，并从中筛选出约180个阳性克隆进行测序。 测序结果显示，共有162条高质量的EST（Expressed Sequence Tags），这些EST经聚类后得到了50条非重复序列。这些序列中有70%与已知基因具有高度同源性，这意味着它们可能对应于已知的功能基因。这些基因涉及植物的基础代谢、信号转导和抗性相关功能。RT-PCR验证进一步确认了SSH结果的可靠性。 通过分析这些差异表达的基因，研究者推测了几种可能参与生防菌与番茄果实相互作用的关键分子，如促分裂原活化蛋白激酶、丝氨酸蛋白酶、GTP结合蛋白、甘露醇脱氢酶以及多种病程相关蛋白。这些分子可能在生防菌诱导的抗性反应中起着核心作用。此外，研究还发现，一些在生防菌处理后差异表达的基因在其他生物和非生物胁迫下也有表达，这表明生防菌可能通过调控这些基因来增强果实对多种胁迫的抵抗力。 这项研究为理解罗伦隐球酵母如何提高番茄果实的抗性提供了重要的基因组学数据，为开发更环保、更安全的果蔬采后处理策略提供了理论基础。未来的研究可能会进一步深入探究这些关键基因的具体功能及其在防御机制中的确切作用。