siRNA表达载体与阳离子脂质体复合物优化转染HepG2.2.15细胞的疗效研究

本研究旨在探讨siRNA表达载体pGenesil-HBV X与阳离子脂质体复合物在转染HepG2.2.15细胞中的应用潜力，由山西长治医学院肝病研究所的杨慧、刘明社等人进行。实验的主要目的是观察这种复合物对HBV X基因沉默的效果以及对HepG2.2.15细胞内HBV M蛋白表达的影响。 研究方法首先设置了两个对照组：非特异性序列对照组使用pGenesil-siAFP表达载体，作为非HBV X特定的转染剂，空白对照组则是未转染的细胞。研究者通过调整pGenesil-HBV X与阳离子脂质体的复合物浓度比例，如8μl：2.5μg，进行转染，并利用荧光显微镜观察转染效率，确定最佳转染剂量配比。转染后的细胞在24、48和72小时内，通过时间分辨荧光免疫测定技术（TRFIA）检测上清液中HBsAg和HbeAg的水平。 结果显示，8μl：2.5μg的复合物剂量显示出最高的转染效率，平均转染率为55.1±4.3%，且对细胞活性影响较小。更为关键的是，转染后48小时和72小时，siRNA表达载体显著抑制了HepG2.2.15细胞内的HBsAg和HbeAg的表达，这表明该复合物在抑制病毒复制方面具有显著效果。 该研究证实了pGenesil-HBV X与阳离子脂质体复合物作为有效的转染工具，能够提高对HBV X基因的沉默效率，并在一定程度上抑制HBV的复制。这对于理解siRNA沉默技术在抗乙肝病毒感染治疗中的作用具有重要意义，为RNA干扰技术在实际临床应用提供了有力的数据支持。未来的研究可能进一步优化转染方法，以期实现更精确、更持久的病毒抑制效果。