STIMI调控TRPC1:HEK293细胞铅内流的关键角色
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更新于2024-09-04
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本文主要探讨了STIMI调控TRPC1在HEK293细胞铅内流中的作用,由作者张洪梅、薛勇和李文军在南方医科大学公共卫生学院的职业卫生与职业医学系进行研究。研究的目的是深入理解Pb2+(铅)如何进入HEK293细胞,并确定TRPC1是否参与这一过程。
实验采用了多步骤的方法来验证这些假设。首先,通过MTT法测定细胞存活率,观察Pb2+对HEK293细胞的影响,结果显示Pb2+会导致细胞存活率下降,并呈现出剂量-反应关系,暗示着铅的毒性效应可能与细胞通透性有关。
接下来,通过Hoechst 33342和 Annexin V+PI染色检测细胞凋亡,证实了Pb2+能够诱导HEK293细胞的程序性死亡。进一步,通过Western Blot技术检测了PARP蛋白表达的变化,PARP是细胞凋亡的一个关键标志物,其表达变化与细胞凋亡程度相关。
为了探究TRPC1的作用,研究人员分别过表达了TRPC1以及使用特异性干扰RNA(siRNA)来减少其表达。实验结果显示,TRPC1的过表达会促进Pb2+进入HEK293细胞,而其表达水平的降低则减少了铅的进入量。这表明TRPC1在铅内流过程中可能起到一个通道或调节器的角色。
此外,文章还提到共转染STIM1DD(一种STIM1的突变体)和TRPC1KK(一种TRPC1的激活剂),发现STIM1DD和TRPC1KK的共同作用显著增加了Pb2+的进入量,相较于单独转染的两组都有显著差异。这一发现支持了STIM1,作为SOCE(store-operated calcium entry,钙离子释放后门控通道)的重要组成部分,通过调控TRPC1参与铅的内流。
该研究揭示了Pb2+诱导HEK293细胞凋亡的分子机制,指出Pb2+可能是通过SOCE通道进入细胞,其中STIM1作为核心分子,通过TRPC1介导这一过程。这对于理解铅暴露对细胞毒性和潜在的健康影响具有重要意义,对于职业卫生和环境安全领域具有理论和实践价值。
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