siRNA靶向c-myc抑制MCF-7乳腺癌细胞生长：实验验证

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本文研究了针对c-myc原癌基因的小干扰RNA (siRNA) 抑制MCF-7乳腺癌细胞的表达及细胞增殖潜力，由周昌华、彭晓东和章崇杰三位作者在四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室进行。研究的目的是明确siRNA技术在乳腺癌治疗中的作用，特别是通过靶向c-myc这一关键致癌基因。 c-myc是一个重要的致癌基因，参与细胞增殖和分化调控。研究者选取了c-myc mRNA 的589-609位碱基作为siRNA的设计靶点，构建了两种类型的siRNA质粒：一种是靶向siRNA质粒p-Mat01-1，具有特异性，另一是错配质粒p-Mis09-1作为对照，以及空载体pEGFP-C1作为非靶向的转染参照。实验使用脂质体Lipo2000包裹siRNA质粒，确保高效且精确的转染到MCF-7乳腺癌细胞中。研究结果显示，转染p-Mat01-1质粒显著地降低了MCF-7细胞内c-myc mRNA 和c-Myc蛋白的表达水平，分别在24小时和第5天达到统计学上的显著性差异（P＜0.01）。同时，这种特异性siRNA抑制导致MCF-7细胞的增殖能力明显下降，在第3天、第5天和第7天都有显著性降低（P＜0.05或P＜0.01）。这个研究初步验证了siRNA技术作为RNA干扰策略的有效性，能够通过下调c-myc/c-Myc表达来抑制乳腺癌细胞的增殖，为乳腺癌的生物治疗提供了实验依据。未来的研究可以进一步优化siRNA设计和转染方法，以期在临床实践中实现更为精确和有效的癌症治疗。这项工作不仅深化了我们对c-myc在乳腺癌发病机制中的理解，也为基因疗法尤其是RNA干扰疗法的发展提供了新的可能性。

针对 c-myc 的 siRNA 抑制 MCF-7 乳腺癌细胞 c-Myc 表达及细胞增殖*

周昌华，彭晓东，章崇杰

四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室（成都 610041）

【摘要】目的观察靶向原癌基因 c-myc 的 siRNA 对 MCF-7 人乳腺癌细胞 c-myc/c-Myc 表达及细胞

增殖的影响。方法以原癌基因 c-myc mRNA 589-609 位碱基为靶序列构建靶向 c-myc 的 siRNA 真核表达

质粒 p-Mat01-1 及其错配质粒 p-Mis09-1，空质粒 pEGFP-C1 为对照，用脂质体 Lipo2000 包裹转染 MCF-7

细胞。采用 RT-PCR、Western blot 检测 c-myc mRNA 及蛋白表达，MTT 法检测 MCF-7 细胞增殖。结果与

pEGFP-C1 及 p-Mis09-1 比较，转染 p-Mat01-1 能够特异性抑制 MCF-7 细胞 c-myc mRNA（24h: P＜0.01）

及蛋白（d 5: P＜0.01）表达，显著降低 MCF-7 细胞增殖能力（d 3: P＜0.05, d 5、7: P＜0.01）。结论采

用 siRNA 表达质粒技术能够有效抑制 MCF-7 乳腺癌细胞 c-myc/c-Myc 表达，初步证实下调 c-myc/c-Myc 表

达能够抑制 MCF-7 细胞增殖，为 RNA 干扰技术在乳腺癌生物治疗中的应用打下一定实验基础。

【关键词】 c-myc 乳腺癌小干扰 RNA RNA 干扰

Inhibition of c-Myc Expression and Proliferation in MCF-7 Breast Cancer Cells by Plasmid-based siRNA

Targeting to Oncogene c-myc

ZHOU Chang-hua, PENG Xiao-dong, ZHANG Chong-ji

.Department of Immunology

，

School of Preclinical and Forensic Medicine

，

Sichuan University

，

Chengdu 610041, China

【Abstract】 Objective To investigate the effects of plasmid-based siRNA targeting to oncogene c-myc

on c-myc/c-Myc expressions and cells proliferation in MCF-7 breast cancer cells. Methods siRNA eukaryotic

expression plasmid p-Mat01-1 targeting to the sequence 589-609 of oncogene c-myc and its mismatch plasmid

p-Mis09-1 were constructed, and transiently transfected MCF-7 cells using Lipo2000. Semi-quantitative RT-PCR

and Western blot were used to analyze the expressions of c-myc/c-Myc in MCF-7 cells, and cells proliferation was

detected by MTT assay. Results p-Mat01-1 inhibited the expressions of c-myc mRNA (24h: P＜0.01) and c-Myc

protein (d 5: P＜0.01) in MCF-7 cells as compared with pEGFP-C1 and p-Mis09-1 controls, and suppressed the

proliferation of MCF-7 cells significantly (d 3: P＜0.05, d 5、7: P＜0.01). Conclusion Plasmid-based siRNA

targeting to oncogene c-myc could inhibit the expressions of c-myc/c-Myc in MCF-7 breast cancer cells efficiently,

suggesting that the downregulation of c-myc/c-Myc could suppress the proliferation of MCF-7 cells in vitro.

【Key words】 c-myc Breast cancer Small interfering RNA RNA interference

* 教育部博士学科点基金（20050610049）和四川省科技厅基金（05SG022-025-02）资助

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△ Corresponding author, E-mail: cjzhang49@hotmail.com

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