优化昆虫SF9细胞悬浮培养瞬时表达GFP的条件

"悬浮培养昆虫细胞SF9瞬时表达GFP的条件优化" 本文主要探讨了在悬浮培养条件下，如何优化昆虫细胞SF9的瞬时基因表达以高效表达绿色荧光蛋白（GFP）。瞬时基因表达是获取重组蛋白的一种快速方法，与稳定的基因表达相比，它不需要细胞筛选过程，能在短时间内生产大量目标蛋白，适用于药物蛋白评估和蛋白质组学研究。 SF9细胞是常用的昆虫细胞系，广泛用于重组蛋白的表达，但关于其瞬时基因表达的研究相对较少，特别是在国内。文章作者郭欣泳、汪才坤、袁凤媚和谢秋玲对这一领域进行了深入研究，旨在为昆虫细胞中的外源蛋白瞬时表达奠定基础。 实验中，他们对多种因素进行了优化，包括细胞接种密度、DNA浓度以及转染试剂聚乙烯亚胺（PEI）与DNA的比例和聚合时间。经过一系列的试验，他们发现最佳的表达条件为：细胞接种密度0.5×106 cells/ml，DNA浓度1µg/ml，PEI与DNA的质量比为3：1，聚合时间为5分钟。在这些条件下，转染效率达到了37%，表明GFP的瞬时表达效果良好。 瞬时基因表达的优势在于快速和高效，而SF9细胞作为昆虫细胞系统的一员，具有良好的蛋白质折叠和后翻译修饰能力，因此，这一研究对于提高重组蛋白的生产速度和质量具有重要意义。此外，优化的瞬时表达条件为其他外源蛋白在昆虫细胞中的表达提供了参考，有助于推动相关领域的研究和发展。 关键词：SF9细胞，瞬时基因表达，聚乙烯亚胺 中图分类号：Q785（生物科学） 总结来看，该研究不仅填补了国内关于昆虫细胞SF9瞬时基因表达的空白，而且为后续的蛋白质工程和生物制药研究提供了实验依据和技术支持。通过不断优化表达条件，可以进一步提高目标蛋白的产量和纯度，对于生物技术产业的发展具有积极促进作用。