第 11 卷第 1 期
2012 年 1 月
杭州师范大学学报(自然科学版)
Journal of Hangzhou Normal University(Natural Science Edition)
Vol .11 No .1 ;
Jan .2012
收稿日期 :2011‐09‐26
基金项目 :国家科技支撑计划项目(2011BAD35B02) ;生物科学国家特色专业建设项目 .
通信作者 :沈 波 (1965 — ) ,男 ,教授 ,博士 ,主要从事水稻生理与遗传研究 .E‐mail :bshen65@ 163 .com
DOI :11 .3969/
j
.issn .1674‐232X .2012 .01 .006
高 效 液 相 色 谱 法 对 黑 米 中 花 色 苷 成 分 的 测 定
应龙彬
1
,俞桑桑
1
,刘催萍
1
,何仁锋
1
,寿珍珍
1
,胡根新
1
,欧阳由男
2
,沈 波
1
(1 .杭州师范大学生命与环境科学学院 ,浙江 杭州 310036 ;2 .中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室 ,浙江 杭州 310006)
摘 要 :建立高效液相色谱(HPLC)检测黑米中花色苷类物质的方法 .黑米粉经石油醚和乙酸乙酯去脂后 ,
70% 乙醇浸提 、超声波处理 、浓缩后 ,进行高效液相检测 .该方法花色苷质量浓度在 0 .005 2 ~ 0 .052 mg/mL 内
具有良好的线性关系(R
2
= 0 .999 8) ,平均回收率为 99 .72% ,RSD 为 0 .91% ,花色苷最低检测限为 0 .1 ng/mL .
该方法操作简便快速 ,精密度和稳定性好 ,可用于从黑色稻米种质资源中筛选高花色苷含量的黑米品种 .
关键词 :黑米 ;花色苷 ;高效液相色谱
中图分类号 :S326 文献标志码 :A
文章编号 :1674‐232X(2012)01‐0028‐05
黑色稻米是指糙米(颖果)色泽为黑色的稻米 ,黑米成熟过程中 ,会在种皮内积聚大量花色苷色素 ,从
而使其糙米呈现棕红色 、紫红色 、紫黑色乃至黑色等颜色
[1‐2]
.研究表明 ,黑色素普遍存在于生物界 ,属于花
色苷类化合物 ,可能结构有矢车菊素‐5‐葡萄糖苷 、天竺葵‐3‐麦芽糖苷‐5‐葡萄糖苷等
[3‐5]
.黑米花色苷作为
一种天然食用色素 ,安全无毒 、色彩鲜艳 ,是黑米具有药效的化学基础 ,具有广泛的疾病预防和健康促进作
用 ,在食品和医药领域具有较大的应用潜力
[6‐8]
.
目前对黑米花色苷的研究主要集中在花色苷资源分布的评价与资源库的建立 、花色苷的生理活性与
功能研究 、花色苷的高效提取与绿色分离技术研究等方面 ,对黑米中花色苷成分的分析报导较少
[9‐13 ]
.本
研究应用高压液相色谱法(HPLC)检测黑米中花色苷的主要成分并作一探讨 ,以期为进一步从黑色稻米
种质资源中筛选高花色苷含量和较纯花色苷组分的黑米品种奠定技术基础 .
1 材料与方法
1 .1 实验材料
以黑稻品种黑占 86 、花叶药糯和九阡黑糯为材料 ,由中国水稻研究所国家水稻种质资源中期库提供 .
1 .2 仪器与试剂
Waters600 高效液相色谱仪 ,2487 紫外检测器 ,数据采集和处理均在 Waters 工作站进行 .
所用黑色素为矢车菊素‐3‐葡萄糖苷(cyanidin‐3‐
g
lucoside)标准品 ,由上海安谱科学仪器公司提供 ;甲
醇 、甲酸为色谱纯 ,HP 公司产品 ;水为超纯净水 ;乙酸乙酯 、石油醚为分析纯 .