AGR2干扰乳腺癌细胞生长与凋亡的关键作用

本文主要探讨了"稳定干扰AGR2乳腺癌细胞系的建立及其功能"这一主题，发表于2011年8月的《南昌大学学报(理科版)》。作者邓呜涛、李飞飞和吕忠显在厦门大学生物医学研究院进行了一系列实验研究。他们首先将AGR2基因的短发夹RNA (shRNA) 表达序列整合到pSUPER质粒中，构建出pSUPER-shAGR2质粒。经过测序确认序列无误后，通过Lipofectamine2000技术将pSUPER-shAGR2和对照质粒分别转染至乳腺癌细胞系MCF7中。 通过流式细胞仪筛选并结合600μg/mL G418的选择性压力，研究人员获得了稳定干扰AGR2的MCF7细胞系和对照细胞系。进一步通过Western blot分析验证了shRNA的有效性，证明了AGR2的蛋白质表达水平显著降低。细胞生长的动态变化通过MTT实验进行评估，结果显示，干扰AGR2的细胞生长显著减缓。 研究者还进行了细胞饥饿和刺激实验，使用无血清酚红培养基让细胞处于饥饿状态12小时后，施加25ng/mL EGF刺激15分钟，观察到稳定干扰AGR2的MCF7细胞系中ERK激酶活性显著降低，而凋亡核心蛋白PARP的表达上调，这表明AGR2对细胞增殖和凋亡有重要调控作用。 该研究不仅建立了稳定的AGR2干扰乳腺癌细胞系，还揭示了AGR2在乳腺癌细胞中抑制生长和促进凋亡的作用，为AGR2作为乳腺癌预后和治疗的潜在靶点提供了有力的实验证据。这些发现对于深入理解AGR2在癌症生物学中的角色以及开发针对AGR2的新型疗法具有重要意义。此外，该研究还提示了AGR2可能通过调控ERK信号通路和细胞凋亡来影响肿瘤转移和生存能力，为未来癌症治疗策略的制定提供了新的思路。