ART1基因沉默调控小鼠结肠癌细胞骨架:关键机制与转移抑制

1 下载量 167 浏览量 更新于2024-09-06 收藏 531KB PDF 举报
本文标题《ART1基因沉默对小鼠结肠癌CT26细胞骨架的影响》聚焦于精氨酸特异性单-ADP-核糖基化作用转移酶-1 (ART1) 在小鼠结肠癌细胞中的功能研究。文章由王娅兰、宋光林等学者合作完成,他们旨在通过深入探讨ART1基因沉默后的效应,来揭示这一基因在小鼠结肠癌CT26细胞骨架重组过程中的关键角色及其潜在机制。 研究方法部分,作者采用了多种实验技术,包括肿瘤细胞划痕实验和Transwell迁移实验来测定ART1基因沉默的稳定细胞株的迁移能力变化。这些实验有助于评估ART1基因沉默对于细胞迁移和扩散能力的影响。同时,通过Western blot技术分析了RhoA、ROCK1(Rho相关的激酶1)、Cofilin1以及磷酸化Cofilin(Ser3)等关键蛋白质的表达差异,这些都是调控细胞骨架动态的关键因子。此外,作者还运用激光扫描共聚焦显微镜观察Phalloidin-Rhodamine标记的肌动蛋白丝的形态变化,以直观地展示细胞骨架的重组情况。流式细胞术则被用来检测F-actin(纤维蛋白)的表达变化,这是衡量细胞骨架稳定性的重要指标。 结果显示,ART1-shRNA(ART1基因沉默的稳定细胞株)处理组的划痕实验和Transwell迁移抑制率分别达到了38.98%和43.67%,相较于对照组,ART1基因沉默显著降低了小鼠结肠癌CT26细胞的迁移能力,并伴随着RhoA、ROCK1和p-cofilin(Ser3)表达水平的显著下降。共聚焦观察显示,ART1沉默导致细胞内聚合状态的肌动蛋白丝减少,表明细胞骨架的正常重构受到抑制。流式细胞术进一步证实了F-actin蛋白表达的下调。 总结来说,ART1基因沉默能够有效抑制小鼠结肠癌CT26细胞的肌动蛋白聚合能力,这可能与其通过调控RhoA/ROCK信号通路的作用密切相关。这一发现提示了ART1在结肠癌细胞侵袭和转移过程中扮演着不可或缺的角色。因此,ART1可能成为结肠癌治疗和预防策略中值得深入探索的潜在靶点。研究结果对于理解癌症细胞的迁移行为和寻找新的治疗途径具有重要的理论和临床价值。