恶性疟原虫MSP119c蛋白在家蚕杆状病毒展示系统中的表达与应用研究

"恶性疟原虫MSP1蛋白C-末端19kD蛋白在家蚕杆状病毒表面展示系统中的表达研究" 这篇论文是关于恶性疟原虫疟疾疫苗研发的一次创新尝试，聚焦于恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1（MSP1）的C-末端19kD（MSP119c）片段。MSP1是疟疾疫苗研究的重要目标，因为它在裂殖子侵入人红细胞后仍保留在表面，能够引发机体的T细胞和B细胞免疫反应，因此被认为是潜在的抗原靶点。 研究者采取的方法是将MSP119c的基因序列连接到一个展示载体pFastBacⅠ-gp64上。这个载体包含信号肽序列和跨膜序列，有助于目标蛋白的正确表达和定位。通过将含有MSP119c基因的质粒转化到大肠杆菌DH10Bac中，实现了与家蚕杆状病毒基因组的转座，生成了Bacmid-gp64-MSP119c。接下来，利用脂质体介导法将重组质粒转染到家蚕BmN细胞中，细胞内部组装成重组杆状病毒BmNPV-gp64-MSP119c并进行复制。 实验结果显示，第三代BmNPV-gp64-MSP119c病毒感染家蚕蛹后，7天收集的发病蚕蛹中，MSP119c蛋白通过Western Blotting和双向电泳被证实成功表达。进一步，纯化的重组病毒粒子用于免疫新西兰雄兔，产生的抗体经过Protein A纯化柱提纯，ELISA检测抗体效价达到了1:8000以上，证明了重组病毒能有效地诱导免疫反应。 这项研究的成功意味着恶性疟原虫的MSP119c蛋白成功地在家蚕杆状病毒表面展示出来，为开发新型疟疾疫苗提供了基础。家蚕杆状病毒表面展示系统作为一种生物反应器，为疫苗制造提供了一种新的途径，可能具有成本效益高、大规模生产潜力的特性。这一成果不仅在疟疾疫苗研发领域具有重要意义，也为其他基于昆虫生物反应器的疫苗制备研究提供了借鉴。