高灵敏比色法检测microRNAs：恒温指数扩增与纳米粒子信号放大

"恒温指数扩增辅助纳米粒子信号放大高灵敏比色法检测microRNAs" 本文报道了一种创新的生物传感技术，用于高灵敏度地检测microRNAs（miRNAs）。miRNAs是生物体内一类重要的非编码RNA分子，它们在细胞调控、发育以及疾病发生中扮演关键角色。当miRNA表达水平异常时，可能与多种疾病，如癌症、心血管病和神经退行性疾病等有关。因此，开发快速、灵敏且特异的miRNA检测方法对于早期诊断和疾病治疗具有重要意义。 在这个研究中，研究人员利用恒温指数扩增反应（Isothermal Exponential Amplification Reaction, 或称othermal Amplification，TA）结合金纳米粒子（Gold Nanoparticles, AuNPs）的信号放大策略，创建了一种新型的比色检测方法。具体来说，他们设计了特殊的传感核酸探针，探针的5'末端被硫代磷酸修饰，这使得探针能与纳米金粒子形成稳定的结合。当目标miRNA存在时，它会与探针的3'末端识别序列发生杂交，启动恒温指数扩增反应。在DNA聚合酶的催化下，探针从金纳米粒子表面脱离，导致纳米金粒子聚集并发生颜色变化，这个颜色变化可以通过紫外-可见光谱仪进行测量，从而定量分析目标miRNA的浓度。 实验结果显示，这种方法的检测线性范围宽广，从50fM（十亿分之五十）到10nM（纳摩尔），最低检测限达到了46fM，检测时间仅为60分钟。此外，由于其高灵敏度，这种方法能够区分单个核苷酸的差异，这对于识别miRNA序列中的微小变异至关重要。 关键词包括：miRNA检测、比色法、恒温指数扩增、金纳米粒子以及硫代磷酸修饰。该工作为miRNA的生物医学应用提供了新的工具，并可能对疾病诊断的精准性和效率产生积极影响。同时，这项技术也展示了纳米技术和生物传感器在生物分析领域的强大潜力。