IGF-1基因转染增强兔ADSCs增殖与HIF-1α, Sox-9表达的研究

该研究论文探讨了"IGF-1基因转染对兔ADSC中Sox-9和HIF-1α表达影响的初步研究"，由张传辉、赵群、李建军、杨军和孙仰白在中国医科大学附属盛京医院进行。研究的主要目的是观察胰岛素样生长因子-1（IGF-1）基因转染对兔脂肪间充质干细胞（ADSCs）中Hypoxia-Inducible Factor-1α (HIF-1α) 和 Sox-9这两种关键分子的影响。HIF-1α在缺氧条件下起着调节细胞适应性和增殖的关键作用，而Sox-9则与成骨和软骨分化密切相关。 实验方法包括从成年新西兰大耳白兔的颈后部皮下脂肪组织中分离并培养ADSCs。通过免疫荧光法确认细胞身份后，采用脂质体介导的pcDNA3.1-IGF-1基因转染技术进行基因转移。随后，使用G418筛选出稳定转染的细胞株，通过RT-PCR和Western blot验证转染后细胞内IGF-1基因的表达以及蛋白质水平的变化。研究还通过MTT法评估了转染后细胞的增殖能力，并通过免疫荧光法检测HIF-1α和Sox-9的表达情况。 结果显示，成功地分离和培养出了带有CD44和CD109标志物的ADSCs。通过基因转染，获得了稳定表达IGF-1的细胞株，转染后的细胞不仅在mRNA水平上表达IGF-1，而且能够将其转化为功能性的蛋白质。此外，转染后的细胞显示出增殖活性增强，同时HIF-1α和Sox-9的表达显著提高。这些发现表明，IGF-1基因转染能够有效地促进ADSCs的增殖，并诱导其表达与软骨修复相关的Sox-9和HIF-1α，这对于组织工程软骨修复的研究具有重要意义。 这项研究不仅提供了对IGF-1在ADSC功能调控中的新认识，也为利用基因工程技术优化软骨组织工程提供了潜在策略，特别是在治疗关节软骨损伤等临床问题上具有潜在的应用价值。