蓝细菌ApcE与ApcF不形成复合物：体内重组与基因双杂交研究

本文主要探讨了蓝细菌别藻蓝蛋白ApcE与ApcF之间的相互作用。作者汪星和潘重针对Anabaena sp. PCC7120这一特定菌株，进行了深入的体内重组实验以及apcE和apcF基因的细菌双杂交研究。研究的重点在于理解这两个蛋白质是否能够形成复合物，这对于蓝细菌的能量传递过程至关重要。 首先，作者通过光谱分析来检测PCB-ApcE/PCB-ApcF复合物的存在。实验结果显示，在提纯前，PCB-ApcE/PCB-ApcF的吸收和荧光光谱峰与PCB-ApcF的峰位置一致，这意味着在未经纯化时，两蛋白似乎可以共存。然而，提纯后的情况发生了变化，光谱峰与PCB-ApcE的峰位置一致，这暗示了在纯化过程中，ApcE与ApcF的结合被破坏，它们并未形成稳定的复合物。 进一步的实验验证，作者通过转化细胞在不同选择性培养基上的生长情况来观察ApcE和ApcF功能。在无3-氨基-1,2,4三氮唑(3-AT)的非选择性培养基上，pBT-apcF与pTRG-apcE的转化细胞能正常生长，但在有3-AT的选择性培养基上无法生长，这表明转化过程中并未产生能够抵抗3-AT的HIS3报告基因，间接证实了ApcE与ApcF之间缺乏相互作用的能力。 文章指出，ApcE和ApcF在蓝细菌能量传递路径中扮演关键角色。ApcE负责通过其N端的藻胆蛋白结构域与PCB连接，可能参与稳定核心区域并促进藻胆体与类囊体膜的物理连接。而ApcF编码的β18.5亚基则是光反应中心II的能量接收者。研究结果揭示了CpcS/CpeS蛋白，它在PCB的生成过程中起着催化作用，涉及到亚铁血红素的氧化。 本研究通过实验数据强有力地证明了在Anabaena sp. PCC7120中，ApcE与ApcF并未形成复合物，这为理解蓝细菌能量传递途径提供了新的见解，并为进一步探讨这两个蛋白质的功能及其在蓝细菌生理中的独立作用奠定了基础。