TaqMan探针实时定量PCR: 肉中单增李斯特菌的高效检测与最低检出限

本研究论文探讨了TaqMan探针在实时定量PCR检测肉品中单增李斯特菌的应用。作者首先利用GenBank数据库公开的单增李斯特菌hlyA基因序列设计了一对引物和一条TaqMan探针，确保了方法的特异性。通过构建含有hlyA基因的阳性重组质粒，并进行了荧光定量PCR扩增，建立了标准曲线，评估了检测的敏感性。 实验结果显示，该方法能够对10株单增李斯特菌产生特异性的扩增曲线，而其他6株非单增李斯特菌没有扩增反应，显示出该方法的高度特异性。定量扩增的标准曲线相关系数达到了0.998，这意味着扩增反应的精确度极高。敏感度更是惊人，仅需19.5 copies·μL-1就能检测到目标菌株，这表明即使在肉品中的低浓度下，也能有效识别。 为了验证实际应用中的性能，研究人员将该方法应用于人工染菌的肉样检测，得出的最低检出限为2.8×10^2 cfu·g^-1，这意味着即使在极低的微生物数量下，也能准确检测出单增李斯特菌的存在。这项研究展示了TaqMan探针结合实时定量PCR技术在肉类食品安全检测中的高效性和准确性，为肉中单增李斯特菌的快速、准确定量检测提供了一种有力工具。 本文的研究成果对于保障食品安全、防止食源性疾病的发生具有重要意义，特别是在肉类加工和流通环节的监控中。此外，这种方法的高特异性和灵敏度可能被推广到其他食品或环境样本的微生物检测中，为食品安全风险评估提供了科学依据。