细胞因子与曲古菌素A联合诱导胚胎干细胞高效转化为肝细胞的方法

该研究论文探讨了利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A (TSA) 联合细胞因子在体外诱导胚胎干细胞 (ES细胞) 分化为肝细胞的方法。由朱小波、张冬梅等人主导的实验在中国科技论文在线首发，他们针对小鼠ES细胞设计了一种三步骤的诱导策略。 首先，研究人员将ES细胞置于含有激活素A的培养液中，这种环境可促进细胞分化，但不包含白血病抑制因子，以避免干扰正常分化过程。经过3天的培养，ES细胞会转化为定形内胚层细胞，为后续的定向分化打下基础。 接下来，诱导过程进入第二阶段，研究人员添加10酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF) 和Trichostatin A (TSA) 的组合，共同作用5天。这样的协同作用可能有助于激活特定的信号通路，引导细胞朝着肝细胞方向发展。 第三步，实验团队加入了其他诱导因子，如HGF (肝细胞生长因子)，进一步刺激细胞分化。在这个阶段，细胞继续培养5天，表现出成熟肝细胞的特征，如糖原储存、对吲哚菁绿的摄取与释放能力。 为了验证诱导效果，研究者们采用光镜观察、免疫荧光技术和实时定量聚合酶链反应 (RT-PCR) 进行检测。结果表明，在18天的诱导后，出现大量呈现类肝脏细胞表型的上皮细胞，它们表达出成体肝脏特有的标志物，如酪氨酸转氨酶、白蛋白、天冬氨酸转氨酶和甲状腺激素结合蛋白。此外，细胞免疫荧光显示细胞角蛋白18、甲胎蛋白和白蛋白均为阳性，进一步确认了分化细胞的特性。 论文的关键点在于，通过这种方法，诱导分化率高达57.38%，这为从ES细胞获得肝细胞提供了一种新的、有效的途径。整个研究对于理解胚胎干细胞的分化机制以及开发新型肝细胞疗法具有重要意义，尤其是在肝细胞损伤或疾病治疗领域具有潜在应用价值。 这项研究通过严谨的实验设计和生物标志物检测，展示了细胞因子和TSA如何协同诱导ES细胞向肝细胞方向分化，并强调了这一技术在临床转化的可能性。