高糖与LPS刺激对肺微血管内皮细胞通透性的影响

"高糖培养脂多糖刺激下肺脏微血管内皮细胞通透性改变" 本文主要探讨了高糖环境对脂多糖（LPS）刺激下肺脏微血管内皮细胞通透性的影响及其可能的机制。研究由刘秀娟、穆恩等学者进行，他们将细胞分为四组进行实验：正常糖组（NG）、正常糖加LPS刺激组（NGL）、高糖组（HG）以及高糖加LPS刺激组（HGL）。实验目的是深入了解高糖如何加剧LPS诱导的血管内皮细胞损伤。 在实验中，通过MTT法检测细胞增殖和活力，发现高糖和LPS刺激组（HGL）相较于正常糖LPS刺激组（NGL），表现出细胞微丝F-actin分布的混乱和细胞膜窗孔的异常增大，这导致了细胞通透性的显著增加。通过免疫荧光法，观察到细胞中F-actin的排列紊乱，这可能影响细胞骨架的稳定性和功能。同时，扫描电镜结果显示，高糖环境下的细胞膜窗孔数量和孔径有明显的增加。 使用Transwell实验来测量内皮细胞对辣根过氧化物酶（HRP）的通透率，发现在高糖和LPS刺激组中，HRP通透量显著增加，表明细胞屏障功能受损。此外，Griess法检测到细胞培养上清中的一氧化氮（NO）含量在高糖和LPS刺激组中显著上升，这可能与细胞损伤有关。 进一步，通过免疫印迹法（Western blot）分析了细胞中DDAH2、iNOS和eNOS三种蛋白质的表达情况。结果显示，高糖和LPS刺激导致DDAH2（一氧化二氮脱氨酶2）表达降低，iNOS（诱导型一氧化氮合酶）表达增加，而eNOS（内皮型一氧化氮合酶）表达减少。这些变化表明高糖环境可能加剧了NO代谢的不平衡，从而对肺脏微血管内皮细胞造成了额外的损害。 LPS刺激可以引起肺脏微血管内皮细胞F-actin的排列紊乱，细胞膜窗孔异常，进而增加细胞通透性。同时，NO代谢失衡，特别是iNOS的增加、DDAH2的减少和eNOS的降低，可能导致细胞内NO水平升高，加剧了细胞损伤。高糖环境似乎增强了这一过程，提示高糖可能通过干扰NO的调节机制，对肺脏微血管内皮细胞产生更严重的损伤。这些发现对于理解脓毒症、糖尿病等疾病中微血管功能障碍的病理机制具有重要意义，并可能为未来开发针对性的治疗策略提供理论依据。