构建传染性喉气管炎病毒gB基因真核表达载体：序列分析与免疫学应用

本研究论文主要关注于传染性喉气管炎病毒（ILTV）的分子生物学研究，特别是针对河南株的gB基因进行克隆、序列分析以及真核表达载体的构建。该研究由廖仲磊等人在2008年发表在《西北农林科技大学学报(自然科学版)》上。 研究目标明确，即构建一个能够表达ILTV gB蛋白的真核表达载体，这对于理解和开发针对该病毒的疫苗具有重要意义。首先，作者从感染鸡胚绒毛尿囊膜的ILTV-XY株中提取病毒DNA，通过聚合酶链反应（PCR）进行扩增，并采用T-A克隆技术将产物进行测序，从而获得了完整的鸡ILTV-XY gB基因序列。这个过程对于确定基因的功能区域和变异至关重要。 接下来，研究人员对获取的gB基因序列与GenBank数据库中的五种不同ILTV gB基因进行了对比分析，包括澳大利亚SA2疫苗株、辽宁疫苗株、烟台株、美国632强毒株和英国Throne强毒株。结果显示，ILTV-XY株gB基因的核苷酸序列与这些对照株高度同源，同源性达到99%以上，但在特定位置有差异：在第89位缺失了一个碱基G，在第102位插入了一个碱基A，导致氨基酸序列的移码突变，这可能影响其生物学功能。 然后，科研人员将克隆得到的gB基因片段整合到了真核表达载体pcDNA3.1中，通过酶切和测序来确认重组质粒pcDNA3.1/gB的成功构建，证明了目的片段已正确插入并连接。这一工作为ILTV的核酸疫苗研究提供了重要的基础材料，因为真核表达载体可以确保外源基因在宿主细胞内正确表达，从而可能用于开发有效的抗病毒免疫策略。 这篇论文不仅贡献了ILTV-XY株gB基因的新序列信息，还展示了如何通过分子生物学技术构建真核表达载体，这对于深入理解ILTV的生物学特性，以及开发针对该病毒的新型疫苗具有实际应用价值。同时，该研究还揭示了基因序列变异对病毒特性和免疫反应的影响，为未来针对传染性喉气管炎的防控提供了科学依据。