家蚕BmBI-1融合Polh基因在杆状病毒表达系统的表达研究

"家蚕膜蛋白BmBI-1融合Polh在家蚕杆状病毒表达系统中的表达" 本文探讨了家蚕膜蛋白BmBI-1（Bax Inhibitor-1）与家蚕杆状病毒表达系统（Baculovirus Expression Vector System, BEVS）的融合表达研究。BmBI-1是一种具有多个跨膜结构域的抗凋亡蛋白，它在细胞凋亡路径中起到关键作用，受到Bcl2和Bax蛋白的调控。该研究从实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中鉴定出一个与小鼠Bax Inhibitor-1基因有52%同源性的序列，被初步命名为BmBI-1。 为了进一步研究BmBI-1的功能和表达，研究人员首先纯化了家蚕杆状病毒的多角体蛋白（Polh），利用其良好的溶解性特点。接着，通过Bac-to-Bac系统构建了两个重组病毒：含有BmBI-1基因的vBmBmBI-1和融合了Polh基因的vBmPolh-BmBI-1。这两个重组病毒被用来感染家蚕BmN细胞，以观察BmBI-1基因的表达情况。 通过SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）和Western blotting分析，结果表明，与多角体蛋白Polh融合可以提高BmBI-1基因的表达效率。随后，使用重组病毒对家蚕五龄幼虫和蚕蛹进行感染，通过Western blotting分析确认Polh-BmBI-1基因在这些生物体中成功表达。此外，荧光定量PCR的结果显示，感染细胞72小时后，BmBI-1蛋白的表达量达到峰值。 这项研究揭示了在家蚕杆状病毒表达系统中，BmBI-1基因可以通过与Polh蛋白融合来增强表达，为后续研究家蚕膜蛋白的功能、细胞凋亡机制以及开发新型生物制品提供了新的策略。同时，这还展示了家蚕作为生物反应器在生产重组蛋白方面的潜力，尤其是在生物医药领域的应用。通过这种方式，科学家们可以更好地理解和利用家蚕的生物学特性，为抗凋亡药物的研发提供可能的途径。