第 4 3 卷 第 6 期
2015年 6 月
西北农林科技大学学报(自然科学版)
Journal of Northwest A & F UniversityCNat. Sri. E d.)
Vol. 43 No. 6
Jun. 2015
网络出版时间:015-05-11 15:03 D O I :10. 13207/j. cnki. jnwafu. 2015. 06. 017
网络出版地址:htt p:// www . cnki. net/kcms/detail/61. 1390. S. 20150511. 1503. 017. html
甘蓝小孢子单倍体植株加倍技术探讨
程芳芳S 张恩慧S杨安平2 ,程永安S许忠民S董 韩 S霍柳青1
(1 西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100;2杨凌职业技术学院生物工程系,陕西杨凌712100)
[摘 要 ] 【目的】比较甘蓝单倍体植株(H 植株)茎生叶及其愈伤组织的秋碱处理时间及愈伤组织大小对再生
植株加倍效果的影响,筛选加倍效果最佳的秋碱处理时间与合适的外植体,为扩大甘蓝小孢子双单倍体植株( D H 株)
群体及提高甘蓝小孢子培养效率奠定基础。【方法】以 3 个甘 蓝H 植株(H 10- 2 3,H 1 0 - 3 和 H10 - 5) 的茎生叶为试材,
用 2. 0 m g / L 秋碱溶液浸泡处理H 植株叶片外植体及其愈伤组织以获得再生D H 植株,设 置 15 ,3 0 和 6 0 h 3 个处理
时间,比较分析秋碱处理叶片外植体和愈伤组织的时间对加倍效果的影响;同时用2. 0 m g / L 秋碱溶液处理大(直径>
1 c m ) 、中(1 c m 8 直径> 0. 5 c m ) 、小 (直 径 〈 0. 5 c m ) 3 种类型的愈伤组织30 h ,比较愈伤组织大小对加倍效果的影
响。【结果】2. 0 m g / L 秋碱处理甘蓝单倍体植株叶片外植体3 0 h ,可 获 得 44. 8 0 % 的平均再生D H 株加倍率;2. 0
m g / L 秋碱处理愈伤组织30 h ,可获得58. 1 3 % 的平均再生D H 株加倍率;2. 0 m g / L 秋碱处理中等大小的愈伤组织
30 h ,可获得51. 1 1 % 的再生D H 株加倍率。【结论】用 2 . 0 m g / L 秋碱处理甘蓝H 植株茎生叶及其愈伤组织30 h ,可
获得较高比例的D H 株 。
[关键词] 秋水仙素;D H 株 ;愈伤组织;单倍体;甘蓝;叶片再生;加倍技术
[ 中图分类号] S635. 103. 6 [文献标志码] A [文章编号] 1 6 71-9387(2015)06-0167-〇7
Technology discussion of doubling cabbage haploid plants
CHENG Fang-fang1 , ZHANG En-hui1 , YANG An-ping2, CHENG Yong-an
1,
XU Z h on g -m i n1 ,DO NG H an 1 ,HUO Liu-qing1
1 Horticulture^ University ^^^^g lin g^n x i 712100 ^ ^ ^ n a ;
2 ^ ^ o g ic a l Engineering &• Technical Collegeogling^nxi 712100,China)
Abstract: 【Objective】 Th is s t u d y investigated the effect of colchicine treatment time of cauline leaves
in c a b b a g e haploid p l a n t s ( H plants) a n d size of callus in colchicine o n doubling effect of regenerated plants
to screen the optimal trea tment time a n d the suitable explants for e xp a n d i n g c ab ba ge double haploid plants
( D H plants) g r o u p s a n d i m p r o v i n g culturing efficiency of ca b b a g e m i c r o s p o r e . 【M e t h o d 】 U s i n g cauline
leaves of three H plants ( H 1 0 - 2 3 ,H 1 0 - 3 a n d H 1 0 - 5 ) as test materials, . 0 m g / L colchicines w a s u sed to
treat leaf explants of H plants a n d callus to obtain regenerated D H plants. T h r e e t r e a t ment time periods
(15 h ,30 h a n d 60 h) a n d 3 types of callus (large callus wi t h d iameter of larger than 1 c m , m e d i u m w it h di
a m e t e r of larger th a n 0. 5 c m a n d less than 1 c m , a n d small w i th diameter of less th a n 0. 5 c m ) wit h treat
m e n t time of 30 h w e r e tested.【Res ult 】 A v e r a g e do ub l e rates of D H plants b y treating the explant of (cab
b a g e leaf blade, callus a n d m e d i u m callus i n 2 . 0 m g / L colchicine for 30 h w e r e 44. 8 0 % , 58. 1 3 % a n d
[收稿日期] 2013-12-20
[基金项目] 国家科技支撑计划项目(2012BAD02B01);西北农林科技大学农业科技推广基金项目(NYY2012-10);陕西省科学技术
研究发展计划项目(2012NKC02-05,2012KTCL02-09)杨凌职业技术学院科学研究基金项目(A2010014);陕西省教育
厅科学研究项目(自然科学专项)(11JK0642)
[作者简介] 程芳芳(1988— ),女,山西长治人,在读硕士,主要从事甘蓝生物技术研究。E-mail :215797704@qq. com
[通信作者] 张恩慧(I960 — ),男,陕西扶风人,教授,硕士,硕士生导师,主要从事甘蓝育种与生物技术研究。
E-mail:ganlan606@126. com