bulk RNA-seq
时间: 2024-08-16 14:03:25 浏览: 99
Bulk_and_singlecell_RNA-seq_pipeline:RT实验室癌症表观遗传学大量RNA序列
Bulk RNA-seq,全称为大规模RNA测序,是一种高通量基因表达分析技术,用于研究生物体内的转录组学。它涉及从大量细胞或组织中提取总RNA,然后通过逆转录过程将RNA转化为互补DNA(cDNA),接着进行文库构建和测序。通过这种方法,科学家可以得到整个细胞样本中所有基因转录本的数量信息,用于检测基因的表达水平、差异表达分析以及功能注释等研究。
Bulk RNA-seq的主要步骤包括:
1. 纯化总RNA:使用特定的试剂盒从细胞或组织中提取RNA。
2. 阳性选择或随机断裂:选择性地保留全长mRNA或随机打断RNA分子,生成各种大小的cDNA片段。
3. 文库制备:将处理后的cDNA连接到接头并富集成DNA克隆群体,形成测序图书馆。
4. 高通量测序:利用新一代测序技术(如Illumina)对文库进行大规模平行测序,产生大量的碱基序列数据。
5. 数据分析:比对序列至参考基因组,统计每个基因的读数,计算表达丰度,并进行差异表达分析。
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