当有一个名为10的excel文件,第一列是gene_id ,第二列是symbol ,第三列名为NPS10 ,第四列名为PSW10 ,第五列为foldchange 第三和第四列数据为样本的表达量,将NPS10作为实验组,PSW10作为对照组。请通过使用R对其进行差异基因分析
时间: 2024-05-05 20:15:44 浏览: 7
首先,需要安装和加载一些必要的R包,包括dplyr、tidyr、edgeR和ggplot2。
```R
# 安装和加载必要的包
install.packages(c("dplyr", "tidyr", "edgeR", "ggplot2"))
library(dplyr)
library(tidyr)
library(edgeR)
library(ggplot2)
```
接下来,读取10.xlsx文件并进行数据整理。首先,将gene_id和symbol列作为行名,然后删除第一列和第二列。最后,将NPS10和PSW10列作为矩阵的两列。
```R
# 读取excel文件
data <- readxl::read_excel("10.xlsx")
# 将gene_id和symbol列作为行名
rownames(data) <- paste(data[, 1], data[, 2], sep="_")
# 删除第一列和第二列
data <- data[, -(1:2)]
# 将NPS10和PSW10列作为矩阵的两列
data <- as.matrix(data[, c("NPS10", "PSW10")])
```
接下来,进行基于edgeR的差异基因分析。首先,将数据转换为edgeR对象。然后,计算基因表达量和规范化因子。接下来,使用glmQLFit和glmQLFTest函数计算差异表达基因,并根据FDR值进行多重比较校正。最后,将结果导出为excel文件。
```R
# 将数据转换为edgeR对象
dge <- DGEList(counts=data, genes=rownames(data))
# 计算基因表达量和规范化因子
dge <- calcNormFactors(dge)
dge <- estimateDisp(dge)
# 计算差异表达基因
fit <- glmQLFit(dge, design=~0+group)
qlf <- glmQLFTest(fit, coef=1)
res <- topTags(qlf, n=nrow(dge), p.value=0.05)
# 多重比较校正
res_adj <- p.adjust(res$table$FDR, method="BH")
res$table$FDR_adj <- res_adj
# 导出结果为excel文件
write.xlsx(as.data.frame(res$table), "diff_genes.xlsx", row.names=FALSE)
```
最后,可视化结果。使用ggplot2包绘制MA图,其中x轴表示logFC,y轴表示-log10(p-value)。
```R
# 绘制MA图
ggplot(res$table, aes(x=logFC, y=-log10(PValue))) +
geom_point(alpha=0.5, color="blue") +
geom_hline(yintercept=-log10(0.05), linetype="dashed") +
geom_vline(xintercept=c(-1, 1), linetype="dashed") +
scale_x_continuous(limits=c(-4, 4), expand=c(0, 0)) +
scale_y_continuous(expand=c(0, 0)) +
labs(x="logFC", y="-log10(p-value)") +
theme_classic()
```