当有一个名为10的excel文件,第一列是gene_id ,第二列是symbol ,第三列名为NPS10 ,第四列名为PSW10 ,第五列为foldchange 第三和第四列数据为样本的表达量,将NPS10作为实验组,PSW10作为对照组。请通过使用R对其进行差异基因分析

时间: 2024-05-05 20:15:44 浏览: 7
首先,需要安装和加载一些必要的R包,包括dplyr、tidyr、edgeR和ggplot2。 ```R # 安装和加载必要的包 install.packages(c("dplyr", "tidyr", "edgeR", "ggplot2")) library(dplyr) library(tidyr) library(edgeR) library(ggplot2) ``` 接下来,读取10.xlsx文件并进行数据整理。首先,将gene_id和symbol列作为行名,然后删除第一列和第二列。最后,将NPS10和PSW10列作为矩阵的两列。 ```R # 读取excel文件 data <- readxl::read_excel("10.xlsx") # 将gene_id和symbol列作为行名 rownames(data) <- paste(data[, 1], data[, 2], sep="_") # 删除第一列和第二列 data <- data[, -(1:2)] # 将NPS10和PSW10列作为矩阵的两列 data <- as.matrix(data[, c("NPS10", "PSW10")]) ``` 接下来,进行基于edgeR的差异基因分析。首先,将数据转换为edgeR对象。然后,计算基因表达量和规范化因子。接下来,使用glmQLFit和glmQLFTest函数计算差异表达基因,并根据FDR值进行多重比较校正。最后,将结果导出为excel文件。 ```R # 将数据转换为edgeR对象 dge <- DGEList(counts=data, genes=rownames(data)) # 计算基因表达量和规范化因子 dge <- calcNormFactors(dge) dge <- estimateDisp(dge) # 计算差异表达基因 fit <- glmQLFit(dge, design=~0+group) qlf <- glmQLFTest(fit, coef=1) res <- topTags(qlf, n=nrow(dge), p.value=0.05) # 多重比较校正 res_adj <- p.adjust(res$table$FDR, method="BH") res$table$FDR_adj <- res_adj # 导出结果为excel文件 write.xlsx(as.data.frame(res$table), "diff_genes.xlsx", row.names=FALSE) ``` 最后,可视化结果。使用ggplot2包绘制MA图,其中x轴表示logFC,y轴表示-log10(p-value)。 ```R # 绘制MA图 ggplot(res$table, aes(x=logFC, y=-log10(PValue))) + geom_point(alpha=0.5, color="blue") + geom_hline(yintercept=-log10(0.05), linetype="dashed") + geom_vline(xintercept=c(-1, 1), linetype="dashed") + scale_x_continuous(limits=c(-4, 4), expand=c(0, 0)) + scale_y_continuous(expand=c(0, 0)) + labs(x="logFC", y="-log10(p-value)") + theme_classic() ```

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