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首页改良5LCelligen反应器下JAL1杂交瘤细胞半连续培养生长与代谢研究
本文主要探讨了半连续培养法在JAL1杂交瘤细胞生产中的应用,这是一种在生物科技领域的关键策略,尤其是在鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的防治中具有重要意义。JAL1杂交瘤细胞是一种专门产生抗IBDV单克隆抗体的细胞,这种抗体在疾病的诊断和治疗中扮演着重要角色,能够显著提升鸡群的免疫力并对抗致病因子。 研究的核心内容包括观察和分析在改良型5LCelligen细胞反应器中,采用半连续培养方式的JAL1杂交瘤细胞的生长和代谢特性。研究人员关注的重点在于监测细胞在培养过程中葡萄糖的消耗情况,因为葡萄糖作为细胞的主要能源,其消耗与细胞活力、生长速度以及抗体产量密切相关。此外,他们还考察了单抗生成量的变化,以及细胞代谢产生的副产品,如乳酸和氨的生成,这些数据对于优化细胞培养条件和控制策略至关重要。 通过这项研究,作者希望能够为优化培养方案和控制策略提供依据,比如调整葡萄糖供应、维持适宜的pH值和溶解氧水平,以提高生产效率并确保产品质量。同时,这也对规模化生产IBDV单抗的工业应用具有指导意义,有助于降低生产成本,提升单抗的商业价值。 文章还提到了IBDV病毒对鸡免疫系统的破坏及其对养鸡业的影响,这强调了研发此类治疗手段和生产策略的重要性。实验采用了先进的5LCelligen细胞反应器,这是一种高效且可控的细胞培养平台,它在生物制药领域有着广泛应用。 这篇文章不仅提供了关于半连续培养JAL1杂交瘤细胞的详细生物化学数据,也展示了其在实际生产环境中如何实现高效和可持续的抗体生产,这对于推动IBDV疫苗和治疗方法的发展具有深远的影响。
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第32卷第2期 上海师范大学学报(自然科学版) Vol.32,No.2
2 0 0 3 年 6 月 Journal of Shanghai N orm al U niversity(N atural Sciences) Ju n . 2 0 0 3
半连续培养 JA L 1 杂交瘤细胞的生长和代谢
赵 渝
1
,赵 冰
2
,胡 昕
2
(1. 上海师范大学 生命与环境科学学院, 上海 200234; 2. 上海交通大学 农学院, 上海 201101)
摘 要: 观察了分泌抗 IB D V 单抗杂交瘤细胞在改良型 5 L C e llig e n 细胞反应器中采用半连续
培养方式的生长和代谢情况,研究了在该工艺过程中的葡萄糖消耗、单抗的生成、乳酸和氨的
产生.同时为培养方案和控制策略进一步的改良确定方向.
关键词: IBDV ;杂交瘤;半连续培养
中图分类号:
Q 953.31
文献标识码:
A
文章编号:
1000-5137(2003)02-0064-04
收稿日期: 2002-02-25
基金项目: 上海市教委基金项目(98E05)
作者简介: 赵渝(1973-), 男, 上海师范大学生命与环境科学学院讲师.
鸡传染性法氏囊病病毒(IBD V )是双 R N A 病毒科禽双 RN A 病毒属的代表成员,主要引起鸡的一种
急性、高度接触性传染病.该病主要破坏中枢免疫系统法氏囊中的 B 淋巴细胞,导致免疫抑制.一方面
使鸡对细菌和其它病毒等致病因子的敏感性增加;另一方面对疫苗的免疫应答能力大大降低,给养鸡业
造成严重危害.国内外在该病的诊断、治疗和预防上都投入了相当大的力量
[1]
.上海交通大学生物技术
研究所从 1987 年起即着手对 IBD 进行研究,于 1989 年率先研制成 JA L1 杂交瘤细胞———囊克灵(商品
名).研制的单抗在十多个省市的养鸡场、种禽场约 100 万头份病鸡临床应用效果显著.因此在细胞反
应器中进行大量繁殖培养,探索出适应于该类杂交瘤细胞繁殖培养的各种最佳工艺参数及体外工厂化
大量生产单抗的最佳方案,对于该产品的推广与应用至关重要.
本文的实验采用了改良型 5L Celligen 细胞反应器及半连续培养方式,考察了该株细胞在反应器中
的代谢情况.
1 材料和方法
1.1 细胞
JA L1 杂交瘤细胞株由本实验室制备
[2]
.其分泌的单抗用于治疗与防治鸡传染性法氏囊病.
1.2 培养基
培养基成分见表 1.低糖培养基和高糖培养基分别用于培养的前期与后期.
表1 培养基成分表
名称 葡萄糖
其他成分
低糖培养基
高糖培养基
1g/L
3 g/L
RPM1640 及 DM EM(GIBCO 产品),其中加入10% 新生小牛血清(杭州江滨生物技术有限公司),以
及NaHCO
3
,丙酮酸钠,L-谷氨酰胺与双抗.
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